中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2013年
10期
126-131
,共6页
李雪%韩曙%杨正安%张映钧%杨嵩明%赵德安%车吉星%李志萌
李雪%韓曙%楊正安%張映鈞%楊嵩明%趙德安%車吉星%李誌萌
리설%한서%양정안%장영균%양숭명%조덕안%차길성%리지맹
大蒜%ISSR-PCR%反应体系%正交设计%优化
大蒜%ISSR-PCR%反應體繫%正交設計%優化
대산%ISSR-PCR%반응체계%정교설계%우화
为探寻出更适宜大蒜的ISSR反应体系,以‘弥渡紫皮’大蒜为试材,对ISSR-PCR反应体系中的5个主要因素(dNTPs、Taq酶、Mg2+、引物浓度、模板DNA)在4个不同水平上进行正交设计L16(45)优化.结果表明,含10×PCR Buffer 2.5 μL、2.5 mmol/L Mg2+、0.15 mmol/L dNTPs、1.5 UTaq DNA聚合酶、0.4 μmol/L引物、20 ng/μL模扳DNA的25 μL反应体系为大蒜的最佳反应体系.利用新建立的反应体系对20个不同大蒜品种进行扩增,具有极好的稳定性和重复性.
為探尋齣更適宜大蒜的ISSR反應體繫,以‘瀰渡紫皮’大蒜為試材,對ISSR-PCR反應體繫中的5箇主要因素(dNTPs、Taq酶、Mg2+、引物濃度、模闆DNA)在4箇不同水平上進行正交設計L16(45)優化.結果錶明,含10×PCR Buffer 2.5 μL、2.5 mmol/L Mg2+、0.15 mmol/L dNTPs、1.5 UTaq DNA聚閤酶、0.4 μmol/L引物、20 ng/μL模扳DNA的25 μL反應體繫為大蒜的最佳反應體繫.利用新建立的反應體繫對20箇不同大蒜品種進行擴增,具有極好的穩定性和重複性.
위탐심출경괄의대산적ISSR반응체계,이‘미도자피’대산위시재,대ISSR-PCR반응체계중적5개주요인소(dNTPs、Taq매、Mg2+、인물농도、모판DNA)재4개불동수평상진행정교설계L16(45)우화.결과표명,함10×PCR Buffer 2.5 μL、2.5 mmol/L Mg2+、0.15 mmol/L dNTPs、1.5 UTaq DNA취합매、0.4 μmol/L인물、20 ng/μL모반DNA적25 μL반응체계위대산적최가반응체계.이용신건립적반응체계대20개불동대산품충진행확증,구유겁호적은정성화중복성.
