中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2013年
10期
11-17
,共7页
张力%于晓英%符红艳%陈己任%李达%陈海霞
張力%于曉英%符紅豔%陳己任%李達%陳海霞
장력%우효영%부홍염%진기임%리체%진해하
红花檵木%实时荧光定量PCR%内参基因%选择
紅花檵木%實時熒光定量PCR%內參基因%選擇
홍화계목%실시형광정량PCR%내삼기인%선택
实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是目前基因定量表达分析的重要方法,而适宜内参基因的选择对目的基因表达特征的准确分析至关重要,研究目的是筛选适宜于红花檵木目的基因qRT-PCR分析的校正内参基因.以红花檵木‘大叶红’(Lorpetalum chinense var.rubrum‘ Dayehong’)的芽、嫩茎、叶、花瓣、种子和愈伤组织为材料,采用qRT-PCR技术比较了4个常用看家基因微管蛋白基因(α-tubulin)、肌动蛋白基因(β-actin)、18S核糖体RNA(18S rRNA)与甘油醛-3-磷酸-脱氢酶基因(GAPDH)的表达情况.4个看家基因均能特异扩增并显示较高的扩增效率；经geNorm和NormFinder程序综合分析,当采用qRT-PCR分析红花檵木不同器官和组织中的基因表达差异时,以GAPDH表达最为稳定；在比较不同发育阶段的叶片及明暗处理的愈伤组织中的基因表达差异时,β-actin表达最为稳定.当采用qRT-PCR分析红花檵木不同器官和组织及不同发育阶段的叶片与明暗处理的愈伤组织基因表达差异时,可以分别选择GAPDH和β-actin作为校正内参基因.
實時熒光定量PCR(qRT-PCR)是目前基因定量錶達分析的重要方法,而適宜內參基因的選擇對目的基因錶達特徵的準確分析至關重要,研究目的是篩選適宜于紅花檵木目的基因qRT-PCR分析的校正內參基因.以紅花檵木‘大葉紅’(Lorpetalum chinense var.rubrum‘ Dayehong’)的芽、嫩莖、葉、花瓣、種子和愈傷組織為材料,採用qRT-PCR技術比較瞭4箇常用看傢基因微管蛋白基因(α-tubulin)、肌動蛋白基因(β-actin)、18S覈糖體RNA(18S rRNA)與甘油醛-3-燐痠-脫氫酶基因(GAPDH)的錶達情況.4箇看傢基因均能特異擴增併顯示較高的擴增效率；經geNorm和NormFinder程序綜閤分析,噹採用qRT-PCR分析紅花檵木不同器官和組織中的基因錶達差異時,以GAPDH錶達最為穩定；在比較不同髮育階段的葉片及明暗處理的愈傷組織中的基因錶達差異時,β-actin錶達最為穩定.噹採用qRT-PCR分析紅花檵木不同器官和組織及不同髮育階段的葉片與明暗處理的愈傷組織基因錶達差異時,可以分彆選擇GAPDH和β-actin作為校正內參基因.
실시형광정량PCR(qRT-PCR)시목전기인정량표체분석적중요방법,이괄의내삼기인적선택대목적기인표체특정적준학분석지관중요,연구목적시사선괄의우홍화계목목적기인qRT-PCR분석적교정내삼기인.이홍화계목‘대협홍’(Lorpetalum chinense var.rubrum‘ Dayehong’)적아、눈경、협、화판、충자화유상조직위재료,채용qRT-PCR기술비교료4개상용간가기인미관단백기인(α-tubulin)、기동단백기인(β-actin)、18S핵당체RNA(18S rRNA)여감유철-3-린산-탈경매기인(GAPDH)적표체정황.4개간가기인균능특이확증병현시교고적확증효솔；경geNorm화NormFinder정서종합분석,당채용qRT-PCR분석홍화계목불동기관화조직중적기인표체차이시,이GAPDH표체최위은정；재비교불동발육계단적협편급명암처리적유상조직중적기인표체차이시,β-actin표체최위은정.당채용qRT-PCR분석홍화계목불동기관화조직급불동발육계단적협편여명암처리적유상조직기인표체차이시,가이분별선택GAPDH화β-actin작위교정내삼기인.
