军医进修学院学报
軍醫進脩學院學報
군의진수학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
2011年
7期
748-751
,共4页
苏全喜%李婉仪%张成%熊符%洪铭范%刘爱群%田素娟
囌全喜%李婉儀%張成%熊符%洪銘範%劉愛群%田素娟
소전희%리완의%장성%웅부%홍명범%류애군%전소연
肌营养不良%面肩肱型%实时荧光定量PCR%RNase H 酶活性
肌營養不良%麵肩肱型%實時熒光定量PCR%RNase H 酶活性
기영양불량%면견굉형%실시형광정량PCR%RNase H 매활성
目的 分析探讨面肩肱型肌营养不良(FSHD)实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)诊断方法的影响因素.方法 通过改变镁离子终浓度、PCR扩增中退火温度、退火时间或延伸时间、RNase H酶用量和活性等,确定FQ-PCR诊断FSHD的最佳反应条件.结果 退火温度55℃、时间20s、镁离子终浓度5.0mM、RNase H酶用量100U、RNase H酶在95℃下灭活8min为最佳反应条件,其中RNase H的活性选择对FSHD诊断的特异性影响较大.结论 通过降低RNase H酶的活性可提高诊断的特异性,最终确立了FSHD的FQ-PCR基因诊断最佳反应条件.
目的 分析探討麵肩肱型肌營養不良(FSHD)實時熒光定量聚閤酶鏈反應(FQ-PCR)診斷方法的影響因素.方法 通過改變鎂離子終濃度、PCR擴增中退火溫度、退火時間或延伸時間、RNase H酶用量和活性等,確定FQ-PCR診斷FSHD的最佳反應條件.結果 退火溫度55℃、時間20s、鎂離子終濃度5.0mM、RNase H酶用量100U、RNase H酶在95℃下滅活8min為最佳反應條件,其中RNase H的活性選擇對FSHD診斷的特異性影響較大.結論 通過降低RNase H酶的活性可提高診斷的特異性,最終確立瞭FSHD的FQ-PCR基因診斷最佳反應條件.
목적 분석탐토면견굉형기영양불량(FSHD)실시형광정량취합매련반응(FQ-PCR)진단방법적영향인소.방법 통과개변미리자종농도、PCR확증중퇴화온도、퇴화시간혹연신시간、RNase H매용량화활성등,학정FQ-PCR진단FSHD적최가반응조건.결과 퇴화온도55℃、시간20s、미리자종농도5.0mM、RNase H매용량100U、RNase H매재95℃하멸활8min위최가반응조건,기중RNase H적활성선택대FSHD진단적특이성영향교대.결론 통과강저RNase H매적활성가제고진단적특이성,최종학립료FSHD적FQ-PCR기인진단최가반응조건.
