国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2012年
9期
1614-1618
,共5页
张奕霞%张晓阳%陈宁宁%李彩云
張奕霞%張曉暘%陳寧寧%李綵雲
장혁하%장효양%진저저%리채운
RNA干扰%整合素连接激酶%视网膜色素上皮细胞%增殖%迁移
RNA榦擾%整閤素連接激酶%視網膜色素上皮細胞%增殖%遷移
RNA간우%정합소련접격매%시망막색소상피세포%증식%천이
RNA interference%ILK%retinal pigment epithelium%migration%proliferation
目的:探讨RNA干扰抑制整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞增殖和迁移的影响.方法:体外培养hRPE细胞,设计并合成特异性人ILK的RNA干扰片段,阳离子脂质体转染入人视网膜色素上皮细胞,利用RT-PCR及Western blot半定量检测siRNA对ILK基因及蛋白表达的抑制作用,MTT方法检测转染前后siRNA对细胞增殖的抑制作用.损伤愈合实验和Transwell实验观察人视网膜色素上皮细胞迁移能力的改变.结果:培养的hRPE细胞存在ILK的基因转录表达,siRNA显著抑制hRPE细胞ILK的mRNA和蛋白表达(P<0.01).MTT、损伤愈合实验和Transwell实验提示转染ILK-siRNA后人视网膜色素上皮细胞的增殖、迁移能力有明显下降,与正常对照组相比有统计学差异(P<0.05).结论:特异性ILK-siRNA能有效抑制ILK在hRPE的mRNA和蛋白的表达并显著降低hRPE的增殖和迁移能力.
目的:探討RNA榦擾抑製整閤素連接激酶(integrin-linked kinase,ILK)對人視網膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)細胞增殖和遷移的影響.方法:體外培養hRPE細胞,設計併閤成特異性人ILK的RNA榦擾片段,暘離子脂質體轉染入人視網膜色素上皮細胞,利用RT-PCR及Western blot半定量檢測siRNA對ILK基因及蛋白錶達的抑製作用,MTT方法檢測轉染前後siRNA對細胞增殖的抑製作用.損傷愈閤實驗和Transwell實驗觀察人視網膜色素上皮細胞遷移能力的改變.結果:培養的hRPE細胞存在ILK的基因轉錄錶達,siRNA顯著抑製hRPE細胞ILK的mRNA和蛋白錶達(P<0.01).MTT、損傷愈閤實驗和Transwell實驗提示轉染ILK-siRNA後人視網膜色素上皮細胞的增殖、遷移能力有明顯下降,與正常對照組相比有統計學差異(P<0.05).結論:特異性ILK-siRNA能有效抑製ILK在hRPE的mRNA和蛋白的錶達併顯著降低hRPE的增殖和遷移能力.
목적:탐토RNA간우억제정합소련접격매(integrin-linked kinase,ILK)대인시망막색소상피(human retinal pigment epithelium,hRPE)세포증식화천이적영향.방법:체외배양hRPE세포,설계병합성특이성인ILK적RNA간우편단,양리자지질체전염입인시망막색소상피세포,이용RT-PCR급Western blot반정량검측siRNA대ILK기인급단백표체적억제작용,MTT방법검측전염전후siRNA대세포증식적억제작용.손상유합실험화Transwell실험관찰인시망막색소상피세포천이능력적개변.결과:배양적hRPE세포존재ILK적기인전록표체,siRNA현저억제hRPE세포ILK적mRNA화단백표체(P<0.01).MTT、손상유합실험화Transwell실험제시전염ILK-siRNA후인시망막색소상피세포적증식、천이능력유명현하강,여정상대조조상비유통계학차이(P<0.05).결론:특이성ILK-siRNA능유효억제ILK재hRPE적mRNA화단백적표체병현저강저hRPE적증식화천이능력.