西南农业学报
西南農業學報
서남농업학보
SOUTHWEST CHINA JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
6期
2327-2332
,共6页
赵跃%王锐%霍金龙%刘丽仙%霍海龙%朱国琪%曾养志
趙躍%王銳%霍金龍%劉麗仙%霍海龍%硃國琪%曾養誌
조약%왕예%곽금룡%류려선%곽해룡%주국기%증양지
版纳微型猪近交系%TNF-α基因%序列分析%系统进化%组织表达
版納微型豬近交繫%TNF-α基因%序列分析%繫統進化%組織錶達
판납미형저근교계%TNF-α기인%서렬분석%계통진화%조직표체
分别提取版纳微型猪近交系18种组织的RNA,反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增肿瘤坏死因子(TNF-α)基因编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH 5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与其他15个物种构建系统进化树.同时采用半定量RT-PCR方法分析TNF-α基因在版纳微型猪近交系18种组织中的表达情况.结果显示,版纳微型猪近交系TNF-α基因编码区全长699 bp(GenBank登录号:JF831365),编码232个氨基酸.氨基酸序列同源性分析表明,与猫等12个物种具有80％以上的相似性,分子系统进化表明与牛、山羊、绵羊及海豚的关系较近.多组织半定量RT-PCR研究表明,TNF-α mRNA在版纳微型猪近交系的多个组织中均有表达,其中在中脑、卵巢、脾、肺、神经及胃中表达量较高.
分彆提取版納微型豬近交繫18種組織的RNA,反轉錄為cDNA,利用RT-PCR方法擴增腫瘤壞死因子(TNF-α)基因編碼區全長序列,將純化的片段與pMD18-T載體連接,轉化大腸桿菌DH 5α,篩選暘性剋隆併測定其序列,利用生物信息學方法分析其序列特徵,併與其他15箇物種構建繫統進化樹.同時採用半定量RT-PCR方法分析TNF-α基因在版納微型豬近交繫18種組織中的錶達情況.結果顯示,版納微型豬近交繫TNF-α基因編碼區全長699 bp(GenBank登錄號:JF831365),編碼232箇氨基痠.氨基痠序列同源性分析錶明,與貓等12箇物種具有80％以上的相似性,分子繫統進化錶明與牛、山羊、綿羊及海豚的關繫較近.多組織半定量RT-PCR研究錶明,TNF-α mRNA在版納微型豬近交繫的多箇組織中均有錶達,其中在中腦、卵巢、脾、肺、神經及胃中錶達量較高.
분별제취판납미형저근교계18충조직적RNA,반전록위cDNA,이용RT-PCR방법확증종류배사인자(TNF-α)기인편마구전장서렬,장순화적편단여pMD18-T재체련접,전화대장간균DH 5α,사선양성극륭병측정기서렬,이용생물신식학방법분석기서렬특정,병여기타15개물충구건계통진화수.동시채용반정량RT-PCR방법분석TNF-α기인재판납미형저근교계18충조직중적표체정황.결과현시,판납미형저근교계TNF-α기인편마구전장699 bp(GenBank등록호:JF831365),편마232개안기산.안기산서렬동원성분석표명,여묘등12개물충구유80％이상적상사성,분자계통진화표명여우、산양、면양급해돈적관계교근.다조직반정량RT-PCR연구표명,TNF-α mRNA재판납미형저근교계적다개조직중균유표체,기중재중뇌、란소、비、폐、신경급위중표체량교고.
