中国心血管病研究
中國心血管病研究
중국심혈관병연구
CHINESE JOURNAL OF CARDIOVASCULAR REVIEW
2013年
10期
794-797,后插1-后插2
,共5页
尚松安%马占龙%陈相汛%安艳丽%丁洁%滕皋军
尚鬆安%馬佔龍%陳相汛%安豔麗%丁潔%滕皋軍
상송안%마점룡%진상신%안염려%정길%등고군
血管平滑肌细胞%表型转化%细胞培养
血管平滑肌細胞%錶型轉化%細胞培養
혈관평활기세포%표형전화%세포배양
Vascular smooth muscle cell%Phenotype modulation%Cell culture
目的 通过两种分离方法体外获取血管平滑肌细胞(VSMCs),比较细胞表型差异及生物学特性,为血管性疾病研究提供精确实验基础.方法 分别采用组织块法及酶消化法获取SD大鼠胸主动脉VSMCs,分为组织块组与酶消化组.倒置显微镜、结晶紫染色观察形态学改变并定量分析；MTT比色法及TransweU细胞迁移实验分别检测分析细胞增殖与迁移活性；流式细胞周期测定细胞周期分布；细胞免疫荧光染色鉴定VSMCs并测定分析收缩型标记蛋白α-平滑肌肌动蛋白(SMA)以及合成型标记蛋白平滑肌胚胎型肌球蛋白重链(SMemb)、原肌球蛋白-4(TPM-4)表达量的变化.结果 两组细胞SMA细胞免疫荧光染色阳性率≥95％,细胞呈现谷峰状结构生长.组织块组与酶消化组两组细胞长径径值分别为(95.10±16.23)μm和(114.67±15.92)μm.与酶消化组相比,组织块组细胞增殖及迁移活性分别增加23.04％和1.54倍(P＜0.05),S+G2期所占比例增加49.68％(P＜0.05),SMA蛋白表达量下降(P＜0.05),SMemb及TPM-4蛋白表达均增加(P＜0.05).结论 组织块法获取细胞多以合成表型为主,酶消化法则主要呈收缩表型.伴随细胞形态学、增殖及迁移活性、表型特异性蛋白表达等不同改变,两种细胞获取方法可为不同目的研究提供精确的体外模型.
目的 通過兩種分離方法體外穫取血管平滑肌細胞(VSMCs),比較細胞錶型差異及生物學特性,為血管性疾病研究提供精確實驗基礎.方法 分彆採用組織塊法及酶消化法穫取SD大鼠胸主動脈VSMCs,分為組織塊組與酶消化組.倒置顯微鏡、結晶紫染色觀察形態學改變併定量分析；MTT比色法及TransweU細胞遷移實驗分彆檢測分析細胞增殖與遷移活性；流式細胞週期測定細胞週期分佈；細胞免疫熒光染色鑒定VSMCs併測定分析收縮型標記蛋白α-平滑肌肌動蛋白(SMA)以及閤成型標記蛋白平滑肌胚胎型肌毬蛋白重鏈(SMemb)、原肌毬蛋白-4(TPM-4)錶達量的變化.結果 兩組細胞SMA細胞免疫熒光染色暘性率≥95％,細胞呈現穀峰狀結構生長.組織塊組與酶消化組兩組細胞長徑徑值分彆為(95.10±16.23)μm和(114.67±15.92)μm.與酶消化組相比,組織塊組細胞增殖及遷移活性分彆增加23.04％和1.54倍(P＜0.05),S+G2期所佔比例增加49.68％(P＜0.05),SMA蛋白錶達量下降(P＜0.05),SMemb及TPM-4蛋白錶達均增加(P＜0.05).結論 組織塊法穫取細胞多以閤成錶型為主,酶消化法則主要呈收縮錶型.伴隨細胞形態學、增殖及遷移活性、錶型特異性蛋白錶達等不同改變,兩種細胞穫取方法可為不同目的研究提供精確的體外模型.
목적 통과량충분리방법체외획취혈관평활기세포(VSMCs),비교세포표형차이급생물학특성,위혈관성질병연구제공정학실험기출.방법 분별채용조직괴법급매소화법획취SD대서흉주동맥VSMCs,분위조직괴조여매소화조.도치현미경、결정자염색관찰형태학개변병정량분석；MTT비색법급TransweU세포천이실험분별검측분석세포증식여천이활성；류식세포주기측정세포주기분포；세포면역형광염색감정VSMCs병측정분석수축형표기단백α-평활기기동단백(SMA)이급합성형표기단백평활기배태형기구단백중련(SMemb)、원기구단백-4(TPM-4)표체량적변화.결과 량조세포SMA세포면역형광염색양성솔≥95％,세포정현곡봉상결구생장.조직괴조여매소화조량조세포장경경치분별위(95.10±16.23)μm화(114.67±15.92)μm.여매소화조상비,조직괴조세포증식급천이활성분별증가23.04％화1.54배(P＜0.05),S+G2기소점비례증가49.68％(P＜0.05),SMA단백표체량하강(P＜0.05),SMemb급TPM-4단백표체균증가(P＜0.05).결론 조직괴법획취세포다이합성표형위주,매소화법칙주요정수축표형.반수세포형태학、증식급천이활성、표형특이성단백표체등불동개변,량충세포획취방법가위불동목적연구제공정학적체외모형.
