CAJ | 학술논문

首先利用不同相对分子质量聚丙烯酸钠从动物血液中分离纯化出超氧化物歧化酶(SOD),探索不同相对分子质量聚丙烯酸钠对SOD提取酶活性的影响.鉴于离子交换层析和凝胶过滤层析纯化时所用材料较昂贵,探索出一条适合工业化大规模生产的纯化方法.利用壳聚糖、亚氨基二乙酸(IDA)和环氧氯丙烷等材料合成一种新填料,根据亲和层析原理去除杂蛋白质,获得电泳纯级超氧化物歧化酶,使酶活性进一步提高,并和离子交换层析和凝胶过滤层析方法相对照,以期自制填料能代替Sephedex,DEAE-sepherose-fast flow等传统昂贵填料,以适合工业化生产.结果显示,低相对分子质量聚丙烯酸钠在血液SOD提纯工艺中更为适用,超滤后的粗酶液经离子交换层析、凝胶过滤层析和壳聚糖亲和层析纯化后经SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳后呈明显的单一条带,单亚基分子量16 kD,比活力达5 585 U/mg和6 148 U/mg,4 739 U/mg;产品得率分别为18.1％和13.7％,15.5％;纯化后活性回收率分别为61.2％,50.8％,42.6％.表明壳聚糖亲和层析方法在新工艺后续纯化工艺中有望代替Sephedex DEAEsepherose-fast flow为基础的传统纯化方法,适合工业化大规模生产.
수선이용불동상대분자질량취병희산납종동물혈액중분리순화출초양화물기화매(SOD),탐색불동상대분자질량취병희산납대SOD제취매활성적영향.감우리자교환층석화응효과려층석순화시소용재료교앙귀,탐색출일조괄합공업화대규모생산적순화방법.이용각취당、아안기이을산(IDA)화배양록병완등재료합성일충신전료,근거친화층석원리거제잡단백질,획득전영순급초양화물기화매,사매활성진일보제고,병화리자교환층석화응효과려층석방법상대조,이기자제전료능대체Sephedex,DEAE-sepherose-fast flow등전통앙귀전료,이괄합공업화생산.결과현시,저상대분자질량취병희산납재혈액SOD제순공예중경위괄용,초려후적조매액경리자교환층석、응효과려층석화각취당친화층석순화후경SDS-PAGE취병희선알응효전영후정명현적단일조대,단아기분자량16 kD,비활력체5 585 U/mg화6 148 U/mg,4 739 U/mg;산품득솔분별위18.1％화13.7％,15.5％;순화후활성회수솔분별위61.2％,50.8％,42.6％.표명각취당친화층석방법재신공예후속순화공예중유망대체Sephedex DEAEsepherose-fast flow위기출적전통순화방법,괄합공업화대규모생산.