浙江农林大学学报
浙江農林大學學報
절강농림대학학보
JOURNAL OF ZHEJIANG FORESTRY COLLEGE
2014年
2期
322-328
,共7页
彭珠清%范辉华%刘宝%刘燕%李静
彭珠清%範輝華%劉寶%劉燕%李靜
팽주청%범휘화%류보%류연%리정
林木育种学%无患子%SRAP-PCR%反应体系%优化
林木育種學%無患子%SRAP-PCR%反應體繫%優化
림목육충학%무환자%SRAP-PCR%반응체계%우화
forest tree breeding%Sapindus mukurossi%SRAP-PCR%reaction system%optimization
建立适合无患子Sapindus mukurossi的相关序列扩增多态性-聚合酶链式反应(SRAP-PCR)最佳反应体系,为研究无患子种质资源的遗传多样性、亲缘关系及遗传改良等奠定基础.以南平产的无患子叶片为材料,采用单因素法对体系中的DNA模板、镁离子、三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs),引物和TaqDNA聚合酶等5因素进行优化.确立了适合无患子SRAP的最佳反应体系(20 μL):1× PCR缓冲液,50 ng模板DNA,2.0 mmol·L-1镁离子,0.2 mmol· L-1 dNTPs,0.5×16.67 nkat (0.5 U) TaqDNA聚合酶,0.4 μmol ·L-1引物.利用该体系对12份无患子种源材料进行PCR扩增,获得了清晰、稳定的DNA谱带,说明优化后的体系适宜无患子地理种源的遗传多样性分析.
建立適閤無患子Sapindus mukurossi的相關序列擴增多態性-聚閤酶鏈式反應(SRAP-PCR)最佳反應體繫,為研究無患子種質資源的遺傳多樣性、親緣關繫及遺傳改良等奠定基礎.以南平產的無患子葉片為材料,採用單因素法對體繫中的DNA模闆、鎂離子、三燐痠堿基脫氧覈苷痠(dNTPs),引物和TaqDNA聚閤酶等5因素進行優化.確立瞭適閤無患子SRAP的最佳反應體繫(20 μL):1× PCR緩遲液,50 ng模闆DNA,2.0 mmol·L-1鎂離子,0.2 mmol· L-1 dNTPs,0.5×16.67 nkat (0.5 U) TaqDNA聚閤酶,0.4 μmol ·L-1引物.利用該體繫對12份無患子種源材料進行PCR擴增,穫得瞭清晰、穩定的DNA譜帶,說明優化後的體繫適宜無患子地理種源的遺傳多樣性分析.
건립괄합무환자Sapindus mukurossi적상관서렬확증다태성-취합매련식반응(SRAP-PCR)최가반응체계,위연구무환자충질자원적유전다양성、친연관계급유전개량등전정기출.이남평산적무환자협편위재료,채용단인소법대체계중적DNA모판、미리자、삼린산감기탈양핵감산(dNTPs),인물화TaqDNA취합매등5인소진행우화.학립료괄합무환자SRAP적최가반응체계(20 μL):1× PCR완충액,50 ng모판DNA,2.0 mmol·L-1미리자,0.2 mmol· L-1 dNTPs,0.5×16.67 nkat (0.5 U) TaqDNA취합매,0.4 μmol ·L-1인물.이용해체계대12빈무환자충원재료진행PCR확증,획득료청석、은정적DNA보대,설명우화후적체계괄의무환자지리충원적유전다양성분석.
