中国眼耳鼻喉科杂志
中國眼耳鼻喉科雜誌
중국안이비후과잡지
CHINESE JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY AND OTOLARYNGOLOGY
2013年
2期
105-108
,共4页
孙红村%郭明丽%王俊阁%张建耀
孫紅村%郭明麗%王俊閣%張建耀
손홍촌%곽명려%왕준각%장건요
喉癌%稳定转染%RNA干扰技术%信号转导及转录激活因子3%细胞侵袭
喉癌%穩定轉染%RNA榦擾技術%信號轉導及轉錄激活因子3%細胞侵襲
후암%은정전염%RNA간우기술%신호전도급전록격활인자3%세포침습
目的 应用RNA干扰技术沉默信号转导及转录激活因子3(STAT3)后,观察对喉鳞状细胞癌2(Hep-2)黏附、迁移、侵袭能力的影响及细胞内细胞黏附分子1(ICAM-1)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的改变,探讨STAT3作用于喉癌的可能侵袭机制.方法 在前期试验筛选出稳定表达siRNA-STAT3的Hep-2细胞系的基础上,应用MTT比色法、划痕法、Transwell法,分别检测其黏附力、迁移力及侵袭力的变化；Western印迹法检测细胞ICAM-1和VEGF蛋白的表达.以siRNA-shNC组和空白组作为对照.结果 ①接种20 min后,各组细胞的黏附率差异不大(P=0.886)；40 min后,siRNA-STAT3组的黏附率小于siRNA-shNC组和空白对照组(P =0.02)；60 min后,黏附抑制效应更加明显(P=0.012).②接种48 h后,空白对照组和siRNA-shNC组的Hep-2细胞向划痕区生长速度明显快于siRNA-STAT3组.③接种24 h后,200倍光学显微镜下显示:siRNA-STAT3组穿过Matrigel基质和滤膜的细胞数明显少于空白对照组和siRNA-shNC组.④Western印迹法结果显示:siRNA-STAT3组ICAM-1和VEGF蛋白的表达量低于siRNA-shNC组和空白对照组.结论 稳定转染重组STAT3基因能显著抑制喉癌Hep-2细胞的黏附、迁移及侵袭能力.STAT3在喉癌的侵袭中起着重要的作用,可能与其调控ICAM-1和VEGF蛋白的表达有关.
目的 應用RNA榦擾技術沉默信號轉導及轉錄激活因子3(STAT3)後,觀察對喉鱗狀細胞癌2(Hep-2)黏附、遷移、侵襲能力的影響及細胞內細胞黏附分子1(ICAM-1)和血管內皮生長因子(VEGF)蛋白錶達的改變,探討STAT3作用于喉癌的可能侵襲機製.方法 在前期試驗篩選齣穩定錶達siRNA-STAT3的Hep-2細胞繫的基礎上,應用MTT比色法、劃痕法、Transwell法,分彆檢測其黏附力、遷移力及侵襲力的變化；Western印跡法檢測細胞ICAM-1和VEGF蛋白的錶達.以siRNA-shNC組和空白組作為對照.結果 ①接種20 min後,各組細胞的黏附率差異不大(P=0.886)；40 min後,siRNA-STAT3組的黏附率小于siRNA-shNC組和空白對照組(P =0.02)；60 min後,黏附抑製效應更加明顯(P=0.012).②接種48 h後,空白對照組和siRNA-shNC組的Hep-2細胞嚮劃痕區生長速度明顯快于siRNA-STAT3組.③接種24 h後,200倍光學顯微鏡下顯示:siRNA-STAT3組穿過Matrigel基質和濾膜的細胞數明顯少于空白對照組和siRNA-shNC組.④Western印跡法結果顯示:siRNA-STAT3組ICAM-1和VEGF蛋白的錶達量低于siRNA-shNC組和空白對照組.結論 穩定轉染重組STAT3基因能顯著抑製喉癌Hep-2細胞的黏附、遷移及侵襲能力.STAT3在喉癌的侵襲中起著重要的作用,可能與其調控ICAM-1和VEGF蛋白的錶達有關.
목적 응용RNA간우기술침묵신호전도급전록격활인자3(STAT3)후,관찰대후린상세포암2(Hep-2)점부、천이、침습능력적영향급세포내세포점부분자1(ICAM-1)화혈관내피생장인자(VEGF)단백표체적개변,탐토STAT3작용우후암적가능침습궤제.방법 재전기시험사선출은정표체siRNA-STAT3적Hep-2세포계적기출상,응용MTT비색법、화흔법、Transwell법,분별검측기점부력、천이력급침습력적변화；Western인적법검측세포ICAM-1화VEGF단백적표체.이siRNA-shNC조화공백조작위대조.결과 ①접충20 min후,각조세포적점부솔차이불대(P=0.886)；40 min후,siRNA-STAT3조적점부솔소우siRNA-shNC조화공백대조조(P =0.02)；60 min후,점부억제효응경가명현(P=0.012).②접충48 h후,공백대조조화siRNA-shNC조적Hep-2세포향화흔구생장속도명현쾌우siRNA-STAT3조.③접충24 h후,200배광학현미경하현시:siRNA-STAT3조천과Matrigel기질화려막적세포수명현소우공백대조조화siRNA-shNC조.④Western인적법결과현시:siRNA-STAT3조ICAM-1화VEGF단백적표체량저우siRNA-shNC조화공백대조조.결론 은정전염중조STAT3기인능현저억제후암Hep-2세포적점부、천이급침습능력.STAT3재후암적침습중기착중요적작용,가능여기조공ICAM-1화VEGF단백적표체유관.
