医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2012年
11期
1155-1159
,共5页
季玉连%赵树立%赵光峰%侯亚义
季玉連%趙樹立%趙光峰%侯亞義
계옥련%조수립%조광봉%후아의
pokemon%p53%IL-6%细胞凋亡%BGC823细胞
pokemon%p53%IL-6%細胞凋亡%BGC823細胞
pokemon%p53%IL-6%세포조망%BGC823세포
目的 原癌基因pokemon是转录抑制因子,高表达于多种肿瘤细胞中,但其在肿瘤发生发展中的机制仍有待阐明.文中研究pokemon在胃腺癌细胞系BGC823中的作用及机制.方法将pokemon的编码片段构建入真核表达载体pcDNA3.1( + )中.将具有靶向沉默pokemon的siRNA互补的DNA构建到pSilencer 3.1 H1-neo中.将构建的质粒pcDNA3.1-pokemon和pSilencer 3.1 H1-3#用脂质体2000转染BGC823细胞.用流式细胞仪检测细胞凋亡,用RT-PCR分析细胞内mRNA的变化,用Western blot检测pokemon蛋白的表达.结果 成功构建了pokemon过表达/干扰载体pcDNA3.1-pokemon和pSilencer 3.1 H1-3#.在BGC823细胞中,过表达的pokemon可显著抑制p53,促进白细胞介素6(IL-6)转录.干扰pokemon基因的表达可使p53的转录增强.pokemon过表达可抑制BGC823的凋亡,沉默pokemon表达可促进凋亡.结论 pokemon抑制胃肿瘤细胞BGC823凋亡,p53和IL-6是pokemon下游的靶基因.
目的 原癌基因pokemon是轉錄抑製因子,高錶達于多種腫瘤細胞中,但其在腫瘤髮生髮展中的機製仍有待闡明.文中研究pokemon在胃腺癌細胞繫BGC823中的作用及機製.方法將pokemon的編碼片段構建入真覈錶達載體pcDNA3.1( + )中.將具有靶嚮沉默pokemon的siRNA互補的DNA構建到pSilencer 3.1 H1-neo中.將構建的質粒pcDNA3.1-pokemon和pSilencer 3.1 H1-3#用脂質體2000轉染BGC823細胞.用流式細胞儀檢測細胞凋亡,用RT-PCR分析細胞內mRNA的變化,用Western blot檢測pokemon蛋白的錶達.結果 成功構建瞭pokemon過錶達/榦擾載體pcDNA3.1-pokemon和pSilencer 3.1 H1-3#.在BGC823細胞中,過錶達的pokemon可顯著抑製p53,促進白細胞介素6(IL-6)轉錄.榦擾pokemon基因的錶達可使p53的轉錄增彊.pokemon過錶達可抑製BGC823的凋亡,沉默pokemon錶達可促進凋亡.結論 pokemon抑製胃腫瘤細胞BGC823凋亡,p53和IL-6是pokemon下遊的靶基因.
목적 원암기인pokemon시전록억제인자,고표체우다충종류세포중,단기재종류발생발전중적궤제잉유대천명.문중연구pokemon재위선암세포계BGC823중적작용급궤제.방법장pokemon적편마편단구건입진핵표체재체pcDNA3.1( + )중.장구유파향침묵pokemon적siRNA호보적DNA구건도pSilencer 3.1 H1-neo중.장구건적질립pcDNA3.1-pokemon화pSilencer 3.1 H1-3#용지질체2000전염BGC823세포.용류식세포의검측세포조망,용RT-PCR분석세포내mRNA적변화,용Western blot검측pokemon단백적표체.결과 성공구건료pokemon과표체/간우재체pcDNA3.1-pokemon화pSilencer 3.1 H1-3#.재BGC823세포중,과표체적pokemon가현저억제p53,촉진백세포개소6(IL-6)전록.간우pokemon기인적표체가사p53적전록증강.pokemon과표체가억제BGC823적조망,침묵pokemon표체가촉진조망.결론 pokemon억제위종류세포BGC823조망,p53화IL-6시pokemon하유적파기인.
