胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2012年
11期
1060-1064
,共5页
张哲%赵曙光%倪阵%刘震雄%唐华%李慧艳%闻勤生
張哲%趙曙光%倪陣%劉震雄%唐華%李慧豔%聞勤生
장철%조서광%예진%류진웅%당화%리혜염%문근생
Kupffer细胞%细胞分离%原代培养%细胞鉴定
Kupffer細胞%細胞分離%原代培養%細胞鑒定
Kupffer세포%세포분리%원대배양%세포감정
目的 观察改良大鼠肝脏Kupffer细胞 (KCs) 分离方法获取KCs的效果.方法 参照Akira提供的方法进行以下改进:① 前灌注液在体灌注,Ⅳ型胶原酶离体灌注消化;② Percoll分离液不连续密度梯度离心;③台盼蓝染色检测分离细胞的活度;④选择性贴壁法纯化获取的细胞;⑤ 吞墨实验、DAB染色及CD163细胞免疫荧光法鉴定所分选细胞.结果 肝脏KCs的获得量为 (3±1.5)×105/g鼠肝,细胞活度＞92%;光镜下细胞呈圆形,培养24 h后呈梭形或多角形;具有较强的吞噬能力,DAB染色呈"煎蛋"样,荧光显微镜下＞99%为KCs.结论 改良的大鼠肝脏KCs分离方法较Akira法能够获取更高纯度的KCs,简捷经济,值得推广.
目的 觀察改良大鼠肝髒Kupffer細胞 (KCs) 分離方法穫取KCs的效果.方法 參照Akira提供的方法進行以下改進:① 前灌註液在體灌註,Ⅳ型膠原酶離體灌註消化;② Percoll分離液不連續密度梯度離心;③檯盼藍染色檢測分離細胞的活度;④選擇性貼壁法純化穫取的細胞;⑤ 吞墨實驗、DAB染色及CD163細胞免疫熒光法鑒定所分選細胞.結果 肝髒KCs的穫得量為 (3±1.5)×105/g鼠肝,細胞活度＞92%;光鏡下細胞呈圓形,培養24 h後呈梭形或多角形;具有較彊的吞噬能力,DAB染色呈"煎蛋"樣,熒光顯微鏡下＞99%為KCs.結論 改良的大鼠肝髒KCs分離方法較Akira法能夠穫取更高純度的KCs,簡捷經濟,值得推廣.
목적 관찰개량대서간장Kupffer세포 (KCs) 분리방법획취KCs적효과.방법 삼조Akira제공적방법진행이하개진:① 전관주액재체관주,Ⅳ형효원매리체관주소화;② Percoll분리액불련속밀도제도리심;③태반람염색검측분리세포적활도;④선택성첩벽법순화획취적세포;⑤ 탄묵실험、DAB염색급CD163세포면역형광법감정소분선세포.결과 간장KCs적획득량위 (3±1.5)×105/g서간,세포활도＞92%;광경하세포정원형,배양24 h후정사형혹다각형;구유교강적탄서능력,DAB염색정"전단"양,형광현미경하＞99%위KCs.결론 개량적대서간장KCs분리방법교Akira법능구획취경고순도적KCs,간첩경제,치득추엄.
