中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2012年
11期
1061-1064
,共4页
XIAO Guang-wen%肖光文%刘良专%徐磊%谢小平%吴移谋
XIAO Guang-wen%肖光文%劉良專%徐磊%謝小平%吳移謀
XIAO Guang-wen%초광문%류량전%서뢰%사소평%오이모
肺炎嗜衣原体%Cpn0425%III型分泌系统
肺炎嗜衣原體%Cpn0425%III型分泌繫統
폐염기의원체%Cpn0425%III형분비계통
目的 构建重组质粒pGEX6p-2/Cpn0425,在E.coli BL21中进行诱导表达,纯化获得重组融合蛋白Cpn0425,并评价其抗原性.方法 PCR扩增肺炎嗜衣原体Cpn0425蛋白编码基因,构建pGEX6p-2/Cpn0425重组质粒,测序正确后在E.coli BL21中诱导表达,用SDS-PAGE和 Western-Blot 进行分析和鉴定.结果 构建了重组质粒pGEX6p-2/Cpn0425,并在E.coli BL21菌中高效表达出Mr约为50kDa的GST-Cpn0425目的 蛋白,超声裂解后SDS-PAGE分析目的 蛋白在菌体细胞内以可溶性形式表达,经采用默克Novagen的GST纯化树脂纯化获得纯度在95%以上的重组蛋白.结论 获得了Cpn0425基因片段,并在E.coli BL21中成功表达,GST-Cpn0425具有良好的抗原性.
目的 構建重組質粒pGEX6p-2/Cpn0425,在E.coli BL21中進行誘導錶達,純化穫得重組融閤蛋白Cpn0425,併評價其抗原性.方法 PCR擴增肺炎嗜衣原體Cpn0425蛋白編碼基因,構建pGEX6p-2/Cpn0425重組質粒,測序正確後在E.coli BL21中誘導錶達,用SDS-PAGE和 Western-Blot 進行分析和鑒定.結果 構建瞭重組質粒pGEX6p-2/Cpn0425,併在E.coli BL21菌中高效錶達齣Mr約為50kDa的GST-Cpn0425目的 蛋白,超聲裂解後SDS-PAGE分析目的 蛋白在菌體細胞內以可溶性形式錶達,經採用默剋Novagen的GST純化樹脂純化穫得純度在95%以上的重組蛋白.結論 穫得瞭Cpn0425基因片段,併在E.coli BL21中成功錶達,GST-Cpn0425具有良好的抗原性.
목적 구건중조질립pGEX6p-2/Cpn0425,재E.coli BL21중진행유도표체,순화획득중조융합단백Cpn0425,병평개기항원성.방법 PCR확증폐염기의원체Cpn0425단백편마기인,구건pGEX6p-2/Cpn0425중조질립,측서정학후재E.coli BL21중유도표체,용SDS-PAGE화 Western-Blot 진행분석화감정.결과 구건료중조질립pGEX6p-2/Cpn0425,병재E.coli BL21균중고효표체출Mr약위50kDa적GST-Cpn0425목적 단백,초성렬해후SDS-PAGE분석목적 단백재균체세포내이가용성형식표체,경채용묵극Novagen적GST순화수지순화획득순도재95%이상적중조단백.결론 획득료Cpn0425기인편단,병재E.coli BL21중성공표체,GST-Cpn0425구유량호적항원성.
