解剖学杂志
解剖學雜誌
해부학잡지
CHINESE JOURNAL OF ANATOMY
2014年
2期
150-153
,共4页
徐莎%王越%孙擎%刘厚奇
徐莎%王越%孫擎%劉厚奇
서사%왕월%손경%류후기
白血病抑制因子受体%TAT融合蛋白%HL-60细胞
白血病抑製因子受體%TAT融閤蛋白%HL-60細胞
백혈병억제인자수체%TAT융합단백%HL-60세포
leukemia inhibitory factor receptor%TAT fusion protein%HL-60 cell
目的:克隆表达HIV-1反式激活蛋白TAT与白血病抑制因子(LIF)受体α亚基胞内区C末端序列(LIFRα-CT3)的融合蛋白(TAT-CT3),并检测其对HL-60细胞增殖的抑制作用.方法:重组构建TAT-CT3和SUMO融合表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导SUMO-TAT-CT3融合蛋白表达.表达产物经亲和层析柱纯化、去除SUMO蛋白标签后获得TAT-CT3融合蛋白,免疫印迹鉴定.采用CCK-8法检测HL-60细胞的抑制率.结果:构建了高表达重组子pET28a-SUMO-TAT-CT3,获得了相对分子质量约为26 kD的TAT-CT3融合蛋白.经活性检测,TAT-CT3融合蛋白能有效抑制HL-60细胞的生长.结论:成功地克隆、表达、纯化TAT-CT3融合蛋白,该融合蛋白具有生物活性,可抑制HL-60细胞的增殖.
目的:剋隆錶達HIV-1反式激活蛋白TAT與白血病抑製因子(LIF)受體α亞基胞內區C末耑序列(LIFRα-CT3)的融閤蛋白(TAT-CT3),併檢測其對HL-60細胞增殖的抑製作用.方法:重組構建TAT-CT3和SUMO融閤錶達質粒,轉化大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導SUMO-TAT-CT3融閤蛋白錶達.錶達產物經親和層析柱純化、去除SUMO蛋白標籤後穫得TAT-CT3融閤蛋白,免疫印跡鑒定.採用CCK-8法檢測HL-60細胞的抑製率.結果:構建瞭高錶達重組子pET28a-SUMO-TAT-CT3,穫得瞭相對分子質量約為26 kD的TAT-CT3融閤蛋白.經活性檢測,TAT-CT3融閤蛋白能有效抑製HL-60細胞的生長.結論:成功地剋隆、錶達、純化TAT-CT3融閤蛋白,該融閤蛋白具有生物活性,可抑製HL-60細胞的增殖.
목적:극륭표체HIV-1반식격활단백TAT여백혈병억제인자(LIF)수체α아기포내구C말단서렬(LIFRα-CT3)적융합단백(TAT-CT3),병검측기대HL-60세포증식적억제작용.방법:중조구건TAT-CT3화SUMO융합표체질립,전화대장간균BL21(DE3),IPTG유도SUMO-TAT-CT3융합단백표체.표체산물경친화층석주순화、거제SUMO단백표첨후획득TAT-CT3융합단백,면역인적감정.채용CCK-8법검측HL-60세포적억제솔.결과:구건료고표체중조자pET28a-SUMO-TAT-CT3,획득료상대분자질량약위26 kD적TAT-CT3융합단백.경활성검측,TAT-CT3융합단백능유효억제HL-60세포적생장.결론:성공지극륭、표체、순화TAT-CT3융합단백,해융합단백구유생물활성,가억제HL-60세포적증식.
