畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2013年
3期
495-500
,共6页
林洁%周荣琼%谭燕财%马光旭%敖冯虎%胡志刚
林潔%週榮瓊%譚燕財%馬光旭%敖馮虎%鬍誌剛
림길%주영경%담연재%마광욱%오풍호%호지강
隐孢子虫%18S rRNA%PCR-RFLP%种系发育分析
隱孢子蟲%18S rRNA%PCR-RFLP%種繫髮育分析
은포자충%18S rRNA%PCR-RFLP%충계발육분석
为鉴定渝西地区奶牛隐孢子虫分离株的种类和基因型,本研究利用巢氏PCR(Nested PCR)扩增18SrRNA基因,PCR产物进行限制性片段长度多态性分析(Restriction fragment length polymorphism analysis,RFLP)；将目的片段克隆至pGEM-T Easy载体,对阳性克隆进行测序,序列用BLAST和MEGA 4.0进行同源性和种系发育分析.结果表明阳性样品均成功扩增出约830 bp的目的基因片段,PCR产物分别经SspⅠ和MboⅡ酶切后进行RFLP分析,显示渝西地区存在3种隐孢子虫,即C.andersoni、C.bovis、C.ryanae.其中C.andersoni为优势虫种.鉴定结果为进一步开展奶牛隐孢子虫的病原生物学研究及该地区隐孢子虫病的监测奠定了基础.
為鑒定渝西地區奶牛隱孢子蟲分離株的種類和基因型,本研究利用巢氏PCR(Nested PCR)擴增18SrRNA基因,PCR產物進行限製性片段長度多態性分析(Restriction fragment length polymorphism analysis,RFLP)；將目的片段剋隆至pGEM-T Easy載體,對暘性剋隆進行測序,序列用BLAST和MEGA 4.0進行同源性和種繫髮育分析.結果錶明暘性樣品均成功擴增齣約830 bp的目的基因片段,PCR產物分彆經SspⅠ和MboⅡ酶切後進行RFLP分析,顯示渝西地區存在3種隱孢子蟲,即C.andersoni、C.bovis、C.ryanae.其中C.andersoni為優勢蟲種.鑒定結果為進一步開展奶牛隱孢子蟲的病原生物學研究及該地區隱孢子蟲病的鑑測奠定瞭基礎.
위감정투서지구내우은포자충분리주적충류화기인형,본연구이용소씨PCR(Nested PCR)확증18SrRNA기인,PCR산물진행한제성편단장도다태성분석(Restriction fragment length polymorphism analysis,RFLP)；장목적편단극륭지pGEM-T Easy재체,대양성극륭진행측서,서렬용BLAST화MEGA 4.0진행동원성화충계발육분석.결과표명양성양품균성공확증출약830 bp적목적기인편단,PCR산물분별경SspⅠ화MboⅡ매절후진행RFLP분석,현시투서지구존재3충은포자충,즉C.andersoni、C.bovis、C.ryanae.기중C.andersoni위우세충충.감정결과위진일보개전내우은포자충적병원생물학연구급해지구은포자충병적감측전정료기출.
