畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2013年
3期
340-350
,共11页
王宵燕%宋成义%高波%李碧春%陈庭锋%何庆玲
王宵燕%宋成義%高波%李碧春%陳庭鋒%何慶玲
왕소연%송성의%고파%리벽춘%진정봉%하경령
梅山猪%Tektin4%精子发生%鞭毛
梅山豬%Tektin4%精子髮生%鞭毛
매산저%Tektin4%정자발생%편모
本研究旨在克隆猪Tektin4基因,并研究该基因在梅山猪组织器官中的时空表达规律.首先,采用RACE方法获得猪Tektin4的cDNA序列,对所获序列进行生物信息学分析；其次采用半定量的方法检测Tektin4在150日龄梅山公母猪组织器官中的表达特征；最后,采用荧光定量的方法分析该基因在2、30、60、90、150日龄段梅山公猪睾丸中的表达规律,并对不同日龄段梅山公猪附睾尾的精子计数.结果显示,猪Tektin4基因cDNA序列全长为1 500 bp,编码447个氨基酸.具有TEKTIN家族保守结构域,即4个Coiled-coils结构,在螺旋Helix2A和Helix2B之间存在TEKTIN家族特征的信号序列RPNVELCRD.猪Tektin4基因编码的氨基酸序列与牛和马的相似性最高为89％,进化距离最近,与热带爪蟾的相似性最低为62％,距离最远.Tektin4在成年公猪睾丸中表达丰度较高.在公猪的垂体和母猪的子官角和输卵管中表达丰度较低,该基因于60 d的睾丸中开始表达,与附睾尾出现完整形态的精于时间相一致.150 d的表达量显著高于其他日龄(P＜0.01).该基因编码氨基酸作为精子尾部的结构蛋白与精子发生有关,并可能与部分组织或器官纤毛发生有关.
本研究旨在剋隆豬Tektin4基因,併研究該基因在梅山豬組織器官中的時空錶達規律.首先,採用RACE方法穫得豬Tektin4的cDNA序列,對所穫序列進行生物信息學分析；其次採用半定量的方法檢測Tektin4在150日齡梅山公母豬組織器官中的錶達特徵；最後,採用熒光定量的方法分析該基因在2、30、60、90、150日齡段梅山公豬睪汍中的錶達規律,併對不同日齡段梅山公豬附睪尾的精子計數.結果顯示,豬Tektin4基因cDNA序列全長為1 500 bp,編碼447箇氨基痠.具有TEKTIN傢族保守結構域,即4箇Coiled-coils結構,在螺鏇Helix2A和Helix2B之間存在TEKTIN傢族特徵的信號序列RPNVELCRD.豬Tektin4基因編碼的氨基痠序列與牛和馬的相似性最高為89％,進化距離最近,與熱帶爪蟾的相似性最低為62％,距離最遠.Tektin4在成年公豬睪汍中錶達豐度較高.在公豬的垂體和母豬的子官角和輸卵管中錶達豐度較低,該基因于60 d的睪汍中開始錶達,與附睪尾齣現完整形態的精于時間相一緻.150 d的錶達量顯著高于其他日齡(P＜0.01).該基因編碼氨基痠作為精子尾部的結構蛋白與精子髮生有關,併可能與部分組織或器官纖毛髮生有關.
본연구지재극륭저Tektin4기인,병연구해기인재매산저조직기관중적시공표체규률.수선,채용RACE방법획득저Tektin4적cDNA서렬,대소획서렬진행생물신식학분석；기차채용반정량적방법검측Tektin4재150일령매산공모저조직기관중적표체특정；최후,채용형광정량적방법분석해기인재2、30、60、90、150일령단매산공저고환중적표체규률,병대불동일령단매산공저부고미적정자계수.결과현시,저Tektin4기인cDNA서렬전장위1 500 bp,편마447개안기산.구유TEKTIN가족보수결구역,즉4개Coiled-coils결구,재라선Helix2A화Helix2B지간존재TEKTIN가족특정적신호서렬RPNVELCRD.저Tektin4기인편마적안기산서렬여우화마적상사성최고위89％,진화거리최근,여열대조섬적상사성최저위62％,거리최원.Tektin4재성년공저고환중표체봉도교고.재공저적수체화모저적자관각화수란관중표체봉도교저,해기인우60 d적고환중개시표체,여부고미출현완정형태적정우시간상일치.150 d적표체량현저고우기타일령(P＜0.01).해기인편마안기산작위정자미부적결구단백여정자발생유관,병가능여부분조직혹기관섬모발생유관.
