哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
5期
436-440
,共5页
蔡富娟%谢基明%康鸿斌%孙晓琳%王娜%李云旭%王玉珍
蔡富娟%謝基明%康鴻斌%孫曉琳%王娜%李雲旭%王玉珍
채부연%사기명%강홍빈%손효림%왕나%리운욱%왕옥진
Rab7%巨噬细胞%真核表达载体%过表达
Rab7%巨噬細胞%真覈錶達載體%過錶達
Rab7%거서세포%진핵표체재체%과표체
目的 构建Rab7的真核表达载体,研究其在小鼠巨噬细胞RAW264.7中的表达.方法 RT-PCR方法分析Rab7在组织和细胞中的表达.以RAW264.7细胞的cDNA为模板,根据GenBank公布的小鼠Rab7全长序列设计引物,扩增Rab7基因的开放阅读框.将其与真核表达载体pcDNA3.1(-)连接,构建pcDNA-Rab7重组质粒.用脂质体将Rab7真核表达载体瞬时转染RAW264.7细胞,RT-PCR和Western blot法鉴定Rab7的过表达.结果 Rab7重组载体测序结果与GenBank中报道的Rab7序列的同源性为100％.RT-PCR和Western blot结果显示Rab7真核表达载体瞬时转染RAW264.7细胞后,Rab7表达显著增高.结论 成功构建了Rab7真核表达载体.为今后研究Rab7在巨噬细胞中的功能奠定了基础.
目的 構建Rab7的真覈錶達載體,研究其在小鼠巨噬細胞RAW264.7中的錶達.方法 RT-PCR方法分析Rab7在組織和細胞中的錶達.以RAW264.7細胞的cDNA為模闆,根據GenBank公佈的小鼠Rab7全長序列設計引物,擴增Rab7基因的開放閱讀框.將其與真覈錶達載體pcDNA3.1(-)連接,構建pcDNA-Rab7重組質粒.用脂質體將Rab7真覈錶達載體瞬時轉染RAW264.7細胞,RT-PCR和Western blot法鑒定Rab7的過錶達.結果 Rab7重組載體測序結果與GenBank中報道的Rab7序列的同源性為100％.RT-PCR和Western blot結果顯示Rab7真覈錶達載體瞬時轉染RAW264.7細胞後,Rab7錶達顯著增高.結論 成功構建瞭Rab7真覈錶達載體.為今後研究Rab7在巨噬細胞中的功能奠定瞭基礎.
목적 구건Rab7적진핵표체재체,연구기재소서거서세포RAW264.7중적표체.방법 RT-PCR방법분석Rab7재조직화세포중적표체.이RAW264.7세포적cDNA위모판,근거GenBank공포적소서Rab7전장서렬설계인물,확증Rab7기인적개방열독광.장기여진핵표체재체pcDNA3.1(-)련접,구건pcDNA-Rab7중조질립.용지질체장Rab7진핵표체재체순시전염RAW264.7세포,RT-PCR화Western blot법감정Rab7적과표체.결과 Rab7중조재체측서결과여GenBank중보도적Rab7서렬적동원성위100％.RT-PCR화Western blot결과현시Rab7진핵표체재체순시전염RAW264.7세포후,Rab7표체현저증고.결론 성공구건료Rab7진핵표체재체.위금후연구Rab7재거서세포중적공능전정료기출.
