林业科学
林業科學
임업과학
SCIENTIA SILVAE SINICAE
2013年
2期
39-45
,共7页
刘长英%赵爱春%李军%吕蕊花%余亚圣%王茜龄%鲁成%余茂德
劉長英%趙愛春%李軍%呂蕊花%餘亞聖%王茜齡%魯成%餘茂德
류장영%조애춘%리군%려예화%여아골%왕천령%로성%여무덕
桑树%查尔酮异构酶%基因克隆%组织表达%原核表达
桑樹%查爾酮異構酶%基因剋隆%組織錶達%原覈錶達
상수%사이동이구매%기인극륭%조직표체%원핵표체
以果叶兼用新桑品种‘嘉陵30号’的果实为材料,采用同源克隆法和抑制PCR法克隆桑树查尔酮异构酶基因(MaCHI)全序列.该基因的基因组序列全长2 402 bp,包含2 112 bp长的ORF和290 bp长的3'UTR序列,ORF由4个外显子和3个内含子组成,该基因编码219个氨基酸.预测MaCHI编码蛋白质的分子质量为23.8 ku,理论等电点为5.29.采用RT-PCR法分析MaCHI在不同组织中的表达水平,在叶片和果中的表达量较高,在根中表达量较低.构建pET-28a(+)-MaCHI原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达.
以果葉兼用新桑品種‘嘉陵30號’的果實為材料,採用同源剋隆法和抑製PCR法剋隆桑樹查爾酮異構酶基因(MaCHI)全序列.該基因的基因組序列全長2 402 bp,包含2 112 bp長的ORF和290 bp長的3'UTR序列,ORF由4箇外顯子和3箇內含子組成,該基因編碼219箇氨基痠.預測MaCHI編碼蛋白質的分子質量為23.8 ku,理論等電點為5.29.採用RT-PCR法分析MaCHI在不同組織中的錶達水平,在葉片和果中的錶達量較高,在根中錶達量較低.構建pET-28a(+)-MaCHI原覈錶達重組質粒,併在大腸桿菌中誘導錶達.
이과협겸용신상품충‘가릉30호’적과실위재료,채용동원극륭법화억제PCR법극륭상수사이동이구매기인(MaCHI)전서렬.해기인적기인조서렬전장2 402 bp,포함2 112 bp장적ORF화290 bp장적3'UTR서렬,ORF유4개외현자화3개내함자조성,해기인편마219개안기산.예측MaCHI편마단백질적분자질량위23.8 ku,이론등전점위5.29.채용RT-PCR법분석MaCHI재불동조직중적표체수평,재협편화과중적표체량교고,재근중표체량교저.구건pET-28a(+)-MaCHI원핵표체중조질립,병재대장간균중유도표체.
