上海医学
上海醫學
상해의학
SHANGHAI MEDICAL JOURNAL
2012年
9期
770-773,前插2
,共5页
安淑娴%臧秀娟%袁伟杰%诸葛一峰%于青
安淑嫻%臧秀娟%袁偉傑%諸葛一峰%于青
안숙한%장수연%원위걸%제갈일봉%우청
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白%半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3%B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白
中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白%半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3%B細胞淋巴瘤/白血病-2相關X蛋白
중성립세포명효매상관지질운재단백%반광안산천동안산단백매3%B세포림파류/백혈병-2상관X단백
目的 观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对大鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用及机制.方法 通过切除一侧肾脏,夹闭对侧肾蒂45 min建立大鼠缺血再灌注损伤模型,将30只成年雄性Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和缺血再灌注给药组,每组10只.将50 μg重组大鼠NGAL溶于2 mL灭菌蒸馏水中,分别于缺血前30 min、缺血中、缺血后30和60 min经缺血再灌注给药组大鼠尾静脉注射0.5 mL,假手术组及缺血再灌注组于相同时间点给予相同剂量的0.9％氯化钠注射液.取再灌注24 h后大鼠的下腔静脉血检测血清肌酐(sCr)和血尿素氮(BUN)水平；采用苏木精-伊红(H E)染色观察肾脏的形态学变化；免疫组织化学染色检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (Caspase-3)的表达；末端转移酶标记技术(TUNEL)染色观察肾小管上皮细胞的凋亡情况.结果 再灌注24 h后,缺血再灌注组的sCr和BUN水平显著高于假手术组及缺血再灌注给药组(P值均＜0.05).光学显微镜下见缺血再灌注给药组的肾脏损伤情况较缺血再灌注组显著减轻.假手术组Bax和Caspase-3的蛋白阳性表达率分别为(3.72±0.48)％、(0.61±0.15)％,缺血再灌注给药组分别为(7.44±1.64)％、(3.17±0.32)％,均显著低于缺血再灌注组的(15.46±1.96)％、(7.29±1.06)％(P值均＜0.05).TUNEL染色见假手术组及缺血再灌注给药组的凋亡细胞数分别为(1.80±0.84)及(7.80±1.92)个/高倍视野,均显著少于缺血再灌注组的(15.40±3.05)个/高倍视野(P值均＜0.05).结论 给予外源性NGAL可抑制Caspase-3激活,减少Bax表达,减轻组织损伤,从而发挥肾脏保护作用,为急性肾损伤的治疗提供新的靶点.
目的 觀察中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)對大鼠缺血再灌註腎損傷的保護作用及機製.方法 通過切除一側腎髒,夾閉對側腎蒂45 min建立大鼠缺血再灌註損傷模型,將30隻成年雄性Sprague Dawley大鼠隨機分為假手術組、缺血再灌註組和缺血再灌註給藥組,每組10隻.將50 μg重組大鼠NGAL溶于2 mL滅菌蒸餾水中,分彆于缺血前30 min、缺血中、缺血後30和60 min經缺血再灌註給藥組大鼠尾靜脈註射0.5 mL,假手術組及缺血再灌註組于相同時間點給予相同劑量的0.9％氯化鈉註射液.取再灌註24 h後大鼠的下腔靜脈血檢測血清肌酐(sCr)和血尿素氮(BUN)水平；採用囌木精-伊紅(H E)染色觀察腎髒的形態學變化；免疫組織化學染色檢測B細胞淋巴瘤/白血病-2相關X蛋白(Bax)及活化的半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3 (Caspase-3)的錶達；末耑轉移酶標記技術(TUNEL)染色觀察腎小管上皮細胞的凋亡情況.結果 再灌註24 h後,缺血再灌註組的sCr和BUN水平顯著高于假手術組及缺血再灌註給藥組(P值均＜0.05).光學顯微鏡下見缺血再灌註給藥組的腎髒損傷情況較缺血再灌註組顯著減輕.假手術組Bax和Caspase-3的蛋白暘性錶達率分彆為(3.72±0.48)％、(0.61±0.15)％,缺血再灌註給藥組分彆為(7.44±1.64)％、(3.17±0.32)％,均顯著低于缺血再灌註組的(15.46±1.96)％、(7.29±1.06)％(P值均＜0.05).TUNEL染色見假手術組及缺血再灌註給藥組的凋亡細胞數分彆為(1.80±0.84)及(7.80±1.92)箇/高倍視野,均顯著少于缺血再灌註組的(15.40±3.05)箇/高倍視野(P值均＜0.05).結論 給予外源性NGAL可抑製Caspase-3激活,減少Bax錶達,減輕組織損傷,從而髮揮腎髒保護作用,為急性腎損傷的治療提供新的靶點.
목적 관찰중성립세포명효매상관지질운재단백(NGAL)대대서결혈재관주신손상적보호작용급궤제.방법 통과절제일측신장,협폐대측신체45 min건립대서결혈재관주손상모형,장30지성년웅성Sprague Dawley대서수궤분위가수술조、결혈재관주조화결혈재관주급약조,매조10지.장50 μg중조대서NGAL용우2 mL멸균증류수중,분별우결혈전30 min、결혈중、결혈후30화60 min경결혈재관주급약조대서미정맥주사0.5 mL,가수술조급결혈재관주조우상동시간점급여상동제량적0.9％록화납주사액.취재관주24 h후대서적하강정맥혈검측혈청기항(sCr)화혈뇨소담(BUN)수평；채용소목정-이홍(H E)염색관찰신장적형태학변화；면역조직화학염색검측B세포림파류/백혈병-2상관X단백(Bax)급활화적반광안산천동안산단백매3 (Caspase-3)적표체；말단전이매표기기술(TUNEL)염색관찰신소관상피세포적조망정황.결과 재관주24 h후,결혈재관주조적sCr화BUN수평현저고우가수술조급결혈재관주급약조(P치균＜0.05).광학현미경하견결혈재관주급약조적신장손상정황교결혈재관주조현저감경.가수술조Bax화Caspase-3적단백양성표체솔분별위(3.72±0.48)％、(0.61±0.15)％,결혈재관주급약조분별위(7.44±1.64)％、(3.17±0.32)％,균현저저우결혈재관주조적(15.46±1.96)％、(7.29±1.06)％(P치균＜0.05).TUNEL염색견가수술조급결혈재관주급약조적조망세포수분별위(1.80±0.84)급(7.80±1.92)개/고배시야,균현저소우결혈재관주조적(15.40±3.05)개/고배시야(P치균＜0.05).결론 급여외원성NGAL가억제Caspase-3격활,감소Bax표체,감경조직손상,종이발휘신장보호작용,위급성신손상적치료제공신적파점.
