畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
11期
1-4
,共4页
师新川%温永俊%王凤雪%王炜%王建科%程世鹏%武华
師新川%溫永俊%王鳳雪%王煒%王建科%程世鵬%武華
사신천%온영준%왕봉설%왕위%왕건과%정세붕%무화
牛副流感病毒3型%真核表达%N基因
牛副流感病毒3型%真覈錶達%N基因
우부류감병독3형%진핵표체%N기인
根据牛副流感病毒3型(BPIV-3)内蒙09株(NM09)全基因组序列(GenBank登录号:JQ063064)设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增出牛副流感病毒3型分离株的核衣壳蛋白(N)基因,通过NheI和NotI限制性内切酶位点亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/Zeo(+),获得真核重组质粒pcDNA3.1-N.采用Superfect转染试剂将重组质粒转染至BSR细胞中,转染后的BSR细胞经间接免疫荧光试验和RT-PCR方法检测,重组质粒pcDNA3.1-N在BSR细胞中能正确表达N蛋白.本研究结果为BPIV-3新型疫苗的研制奠定基础.
根據牛副流感病毒3型(BPIV-3)內矇09株(NM09)全基因組序列(GenBank登錄號:JQ063064)設計特異性引物,利用RT-PCR方法擴增齣牛副流感病毒3型分離株的覈衣殼蛋白(N)基因,通過NheI和NotI限製性內切酶位點亞剋隆至真覈錶達載體pcDNA3.1/Zeo(+),穫得真覈重組質粒pcDNA3.1-N.採用Superfect轉染試劑將重組質粒轉染至BSR細胞中,轉染後的BSR細胞經間接免疫熒光試驗和RT-PCR方法檢測,重組質粒pcDNA3.1-N在BSR細胞中能正確錶達N蛋白.本研究結果為BPIV-3新型疫苗的研製奠定基礎.
근거우부류감병독3형(BPIV-3)내몽09주(NM09)전기인조서렬(GenBank등록호:JQ063064)설계특이성인물,이용RT-PCR방법확증출우부류감병독3형분리주적핵의각단백(N)기인,통과NheI화NotI한제성내절매위점아극륭지진핵표체재체pcDNA3.1/Zeo(+),획득진핵중조질립pcDNA3.1-N.채용Superfect전염시제장중조질립전염지BSR세포중,전염후적BSR세포경간접면역형광시험화RT-PCR방법검측,중조질립pcDNA3.1-N재BSR세포중능정학표체N단백.본연구결과위BPIV-3신형역묘적연제전정기출.
