CAJ | 학술논문

Rop(Rho-related GTPase of plant)是植物中存在的一种特殊的小G蛋白.其与GTP(guanosine triphosphate)结合形成激活态,与GDP(guanosine diphosphate)结合形成失活态,并通过其激活态和失活态的转换启动和终止植物多种信号过程.Rop不同结合形式的转换受到一系列调控因子的调控.本研究以一个辣椒(Capsicum annuum L.)Rop蛋白(CaRop1)的组成型激活态CA-CaRop1为诱饵,利用ProQuestTM酵母双杂交体系,从辣椒幼苗猎物文库中分离获得一种Rop GTPase激活蛋白(Rop GTPase activating proteins,RopGAP)基因,将其命名为CaRopGAP3.生物信息学分析表明,CaRoGA P3全长1 597 bp,包含一个1 437bp的开放阅读框,编码478个氨基酸,其氨基酸序列不仅含有3个保守的GAP结构域,其N端还含有CRIB(Cdc42/Rac-interactive binding motif)结构域,属于植物特有的一类RopGAP亚家族.酵母双杂交验证显示CaRopGAP3只能与组成型激活态(CA)的CA-CaRop1互作而不能与显性失活态(DN)的DN-CaRop1互作,且含CRIB结构域的N端对他们之间的互作没有明显的调控作用.亚细胞定位分析显示,CaRopGAP3主要分布于细胞膜上,且含CRIB结构的N端在其膜定位中起重要调节作用.荧光定量PCR分析显示,CaRop GA P3基因在辣椒幼叶中的表达量最高,约为幼根的17倍、成熟根和花器官的8倍.CaRopGAP3基因的这种结构及组织表达特点可能与其参与的特定信号路径密切相关.本研究为进一步解析辣椒CaRop1介导的信号调控机制提供基础数据.
Rop(Rho-related GTPase of plant)시식물중존재적일충특수적소G단백.기여GTP(guanosine triphosphate)결합형성격활태,여GDP(guanosine diphosphate)결합형성실활태,병통과기격활태화실활태적전환계동화종지식물다충신호과정.Rop불동결합형식적전환수도일계렬조공인자적조공.본연구이일개랄초(Capsicum annuum L.)Rop단백(CaRop1)적조성형격활태CA-CaRop1위유이,이용ProQuestTM효모쌍잡교체계,종랄초유묘작물문고중분리획득일충Rop GTPase격활단백(Rop GTPase activating proteins,RopGAP)기인,장기명명위CaRopGAP3.생물신식학분석표명,CaRoGA P3전장1 597 bp,포함일개1 437bp적개방열독광,편마478개안기산,기안기산서렬불부함유3개보수적GAP결구역,기N단환함유CRIB(Cdc42/Rac-interactive binding motif)결구역,속우식물특유적일류RopGAP아가족.효모쌍잡교험증현시CaRopGAP3지능여조성형격활태(CA)적CA-CaRop1호작이불능여현성실활태(DN)적DN-CaRop1호작,차함CRIB결구역적N단대타문지간적호작몰유명현적조공작용.아세포정위분석현시,CaRopGAP3주요분포우세포막상,차함CRIB결구적N단재기막정위중기중요조절작용.형광정량PCR분석현시,CaRop GA P3기인재랄초유협중적표체량최고,약위유근적17배、성숙근화화기관적8배.CaRopGAP3기인적저충결구급조직표체특점가능여기삼여적특정신호로경밀절상관.본연구위진일보해석랄초CaRop1개도적신호조공궤제제공기출수거.