科学技术与工程
科學技術與工程
과학기술여공정
SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING
2012年
32期
8637-8641
,共5页
重组腺病毒产率%Trex-293%搅拌式培养瓶(Spinner Flask)%悬浮培养
重組腺病毒產率%Trex-293%攪拌式培養瓶(Spinner Flask)%懸浮培養
중조선병독산솔%Trex-293%교반식배양병(Spinner Flask)%현부배양
为了提高病毒产率并避免制备的重组腺病毒产物中残留的动物血清,将贴壁生长的Trex-293细胞用无动物血清的CD293培养基在搅拌式培养瓶中悬浮培养.分析比较其生长特征及不同条件下的病毒产率.结果表明悬浮培养的细胞生长为稳定状态的时间比贴壁培养时稍长,但每次以(4-6)×105 cells/mL密度传代.(3-4)d后基本达到2×106 cells/mL,21 d达3×106 cells/mL以上,比贴壁细胞密度约高3倍.培养初期,悬浮细胞存活率稍低,培养14 d开始维持90％以上,细胞倍增时间约32 h.而贴壁细胞存活率是基本维持在95％以上.重组腺病毒以200,500和1000 VP/cell的比例感染悬浮细胞所获产率均值各为18000,14000和990 VP/cell,而1000 VP/cell的比例感染贴壁细胞所获产率均值为10500 VP/cell.结论为Trex-293细胞用无动物血清的培养基在搅拌式培养瓶中可悬浮培养,当重组腺病毒感染比例为200 VP/cell,感染后48 h,细胞存活率50％时收获有利于提高病毒产率,且高于感染贴壁细胞所获产率.
為瞭提高病毒產率併避免製備的重組腺病毒產物中殘留的動物血清,將貼壁生長的Trex-293細胞用無動物血清的CD293培養基在攪拌式培養瓶中懸浮培養.分析比較其生長特徵及不同條件下的病毒產率.結果錶明懸浮培養的細胞生長為穩定狀態的時間比貼壁培養時稍長,但每次以(4-6)×105 cells/mL密度傳代.(3-4)d後基本達到2×106 cells/mL,21 d達3×106 cells/mL以上,比貼壁細胞密度約高3倍.培養初期,懸浮細胞存活率稍低,培養14 d開始維持90％以上,細胞倍增時間約32 h.而貼壁細胞存活率是基本維持在95％以上.重組腺病毒以200,500和1000 VP/cell的比例感染懸浮細胞所穫產率均值各為18000,14000和990 VP/cell,而1000 VP/cell的比例感染貼壁細胞所穫產率均值為10500 VP/cell.結論為Trex-293細胞用無動物血清的培養基在攪拌式培養瓶中可懸浮培養,噹重組腺病毒感染比例為200 VP/cell,感染後48 h,細胞存活率50％時收穫有利于提高病毒產率,且高于感染貼壁細胞所穫產率.
위료제고병독산솔병피면제비적중조선병독산물중잔류적동물혈청,장첩벽생장적Trex-293세포용무동물혈청적CD293배양기재교반식배양병중현부배양.분석비교기생장특정급불동조건하적병독산솔.결과표명현부배양적세포생장위은정상태적시간비첩벽배양시초장,단매차이(4-6)×105 cells/mL밀도전대.(3-4)d후기본체도2×106 cells/mL,21 d체3×106 cells/mL이상,비첩벽세포밀도약고3배.배양초기,현부세포존활솔초저,배양14 d개시유지90％이상,세포배증시간약32 h.이첩벽세포존활솔시기본유지재95％이상.중조선병독이200,500화1000 VP/cell적비례감염현부세포소획산솔균치각위18000,14000화990 VP/cell,이1000 VP/cell적비례감염첩벽세포소획산솔균치위10500 VP/cell.결론위Trex-293세포용무동물혈청적배양기재교반식배양병중가현부배양,당중조선병독감염비례위200 VP/cell,감염후48 h,세포존활솔50％시수획유리우제고병독산솔,차고우감염첩벽세포소획산솔.
