中华实用儿科临床杂志
中華實用兒科臨床雜誌
중화실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2014年
3期
194-198
,共5页
胡梦泽%师晓东%王天有%刘嵘%玄立田%陈燕飞
鬍夢澤%師曉東%王天有%劉嶸%玄立田%陳燕飛
호몽택%사효동%왕천유%류영%현립전%진연비
survivin基因%小干扰RNA%实时定量聚合酶链反应%肿瘤
survivin基因%小榦擾RNA%實時定量聚閤酶鏈反應%腫瘤
survivin기인%소간우RNA%실시정량취합매련반응%종류
Survivin gene%Small interfering RNA%Real-time polymerase chain reaction%Cancer
目的 探讨针对survivin基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人肺癌A549、宫颈癌Hela S3及急性髓系白血病K562细胞株的效应,筛选有效的siRNA序列.方法 设计并合成3条针对survivin基因的siRNA,通过Hiperfect脂质体转染试剂分别转染A549、Hela S3及K562细胞,培养48 ～ 72 h后,用SYBR Green Ⅰ的实时定量PCR (RT-PCR)方法检测肿瘤细胞survivin mRNA的表达,用WST-8细胞计数试剂盒检测肿瘤细胞的增殖.结果 转染了特异性siRNA的肿瘤细胞survivin基因的表达量明显下降,转染后48 h基因表达抑制率为57.47％～88.53％,72 h为69.94％～95.03％;转染后各组肿瘤细胞增殖受到明显抑制,转染后48 h的细胞增殖抑制率为27.88％～47.36％,72 h为42.59％～57.29％;其中序列1的效果最为显著,对3种肿瘤细胞survivin基因表达的抑制率48 h均在75％以上、72 h均在90％以上,对细胞增殖的抑制率48 h均在40％以上、72 h均达50％以上.结论 siRNA能有效沉默survivin基因在多种肿瘤细胞中的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,所设计的3条survivin siRNA序列均有活性,以序列1作用最强.
目的 探討針對survivin基因的小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)對人肺癌A549、宮頸癌Hela S3及急性髓繫白血病K562細胞株的效應,篩選有效的siRNA序列.方法 設計併閤成3條針對survivin基因的siRNA,通過Hiperfect脂質體轉染試劑分彆轉染A549、Hela S3及K562細胞,培養48 ～ 72 h後,用SYBR Green Ⅰ的實時定量PCR (RT-PCR)方法檢測腫瘤細胞survivin mRNA的錶達,用WST-8細胞計數試劑盒檢測腫瘤細胞的增殖.結果 轉染瞭特異性siRNA的腫瘤細胞survivin基因的錶達量明顯下降,轉染後48 h基因錶達抑製率為57.47％～88.53％,72 h為69.94％～95.03％;轉染後各組腫瘤細胞增殖受到明顯抑製,轉染後48 h的細胞增殖抑製率為27.88％～47.36％,72 h為42.59％～57.29％;其中序列1的效果最為顯著,對3種腫瘤細胞survivin基因錶達的抑製率48 h均在75％以上、72 h均在90％以上,對細胞增殖的抑製率48 h均在40％以上、72 h均達50％以上.結論 siRNA能有效沉默survivin基因在多種腫瘤細胞中的錶達,抑製腫瘤細胞的增殖,所設計的3條survivin siRNA序列均有活性,以序列1作用最彊.
목적 탐토침대survivin기인적소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)대인폐암A549、궁경암Hela S3급급성수계백혈병K562세포주적효응,사선유효적siRNA서렬.방법 설계병합성3조침대survivin기인적siRNA,통과Hiperfect지질체전염시제분별전염A549、Hela S3급K562세포,배양48 ～ 72 h후,용SYBR Green Ⅰ적실시정량PCR (RT-PCR)방법검측종류세포survivin mRNA적표체,용WST-8세포계수시제합검측종류세포적증식.결과 전염료특이성siRNA적종류세포survivin기인적표체량명현하강,전염후48 h기인표체억제솔위57.47％～88.53％,72 h위69.94％～95.03％;전염후각조종류세포증식수도명현억제,전염후48 h적세포증식억제솔위27.88％～47.36％,72 h위42.59％～57.29％;기중서렬1적효과최위현저,대3충종류세포survivin기인표체적억제솔48 h균재75％이상、72 h균재90％이상,대세포증식적억제솔48 h균재40％이상、72 h균체50％이상.결론 siRNA능유효침묵survivin기인재다충종류세포중적표체,억제종류세포적증식,소설계적3조survivin siRNA서렬균유활성,이서렬1작용최강.
