军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2013年
4期
263-266,270
,共5页
孙燕%肖凤君%张怡堃%孙慧燕%王华%王立生
孫燕%肖鳳君%張怡堃%孫慧燕%王華%王立生
손연%초봉군%장이곤%손혜연%왕화%왕립생
微小RNA-486%造血干细胞%红系分化%GATA1
微小RNA-486%造血榦細胞%紅繫分化%GATA1
미소RNA-486%조혈간세포%홍계분화%GATA1
目的 微小RNA(microRNA,miRNA)参与造血干细胞增殖分化的调节.微小RNA-486(microRNA-486,miR-486)是人胎肝组织中表达丰度较高的miRNA,但其在造血细胞分化的表达及其对分化的调控作用并不清楚.本研究旨在观察miR-486在造血细胞分化中的表达变化及调控.方法 利用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-QPCR)方法检测了小鼠各组织miR-486的表达情况.分离人脐带血CD34+细胞,并在含有不同造血生长因子组合的培养体系中进行分化诱导:利用流式细胞仪检测造血细胞分化效率,并用RT-QPCR检测miR-486的表达.采用慢病毒介导的GATA1沉默策略抑制CD34+细胞的红系分化并检测miR-486的表达.结果 RT-QPCR检测了miR-486在正常小鼠各组织的表达情况,证明其在造血细胞中表达量最高.在脐带血CD34+细胞的体外定向诱导分化过程中,随着细胞向红系分化,miR-486表达增高.慢病毒介导的GATA1-小发夹RNA(shRNA)转染能够沉默脐带血CD34+ 细胞GATA1的表达,并阻断其向红系分化,同时,miR-486的表达水平也明显降低.结论 miR-486是一种与红系造血分化密切相关的miRNA.
目的 微小RNA(microRNA,miRNA)參與造血榦細胞增殖分化的調節.微小RNA-486(microRNA-486,miR-486)是人胎肝組織中錶達豐度較高的miRNA,但其在造血細胞分化的錶達及其對分化的調控作用併不清楚.本研究旨在觀察miR-486在造血細胞分化中的錶達變化及調控.方法 利用實時定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-QPCR)方法檢測瞭小鼠各組織miR-486的錶達情況.分離人臍帶血CD34+細胞,併在含有不同造血生長因子組閤的培養體繫中進行分化誘導:利用流式細胞儀檢測造血細胞分化效率,併用RT-QPCR檢測miR-486的錶達.採用慢病毒介導的GATA1沉默策略抑製CD34+細胞的紅繫分化併檢測miR-486的錶達.結果 RT-QPCR檢測瞭miR-486在正常小鼠各組織的錶達情況,證明其在造血細胞中錶達量最高.在臍帶血CD34+細胞的體外定嚮誘導分化過程中,隨著細胞嚮紅繫分化,miR-486錶達增高.慢病毒介導的GATA1-小髮夾RNA(shRNA)轉染能夠沉默臍帶血CD34+ 細胞GATA1的錶達,併阻斷其嚮紅繫分化,同時,miR-486的錶達水平也明顯降低.結論 miR-486是一種與紅繫造血分化密切相關的miRNA.
목적 미소RNA(microRNA,miRNA)삼여조혈간세포증식분화적조절.미소RNA-486(microRNA-486,miR-486)시인태간조직중표체봉도교고적miRNA,단기재조혈세포분화적표체급기대분화적조공작용병불청초.본연구지재관찰miR-486재조혈세포분화중적표체변화급조공.방법 이용실시정량PCR(real-time quantitative PCR,RT-QPCR)방법검측료소서각조직miR-486적표체정황.분리인제대혈CD34+세포,병재함유불동조혈생장인자조합적배양체계중진행분화유도:이용류식세포의검측조혈세포분화효솔,병용RT-QPCR검측miR-486적표체.채용만병독개도적GATA1침묵책략억제CD34+세포적홍계분화병검측miR-486적표체.결과 RT-QPCR검측료miR-486재정상소서각조직적표체정황,증명기재조혈세포중표체량최고.재제대혈CD34+세포적체외정향유도분화과정중,수착세포향홍계분화,miR-486표체증고.만병독개도적GATA1-소발협RNA(shRNA)전염능구침묵제대혈CD34+ 세포GATA1적표체,병조단기향홍계분화,동시,miR-486적표체수평야명현강저.결론 miR-486시일충여홍계조혈분화밀절상관적miRNA.
