中华实用儿科临床杂志
中華實用兒科臨床雜誌
중화실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2014年
3期
182-185
,共4页
刘健%张小玲%胡群%刘爱国%刘双又%张柳清
劉健%張小玲%鬍群%劉愛國%劉雙又%張柳清
류건%장소령%호군%류애국%류쌍우%장류청
小檗碱%白血病细胞%凋亡%鼠双微粒体2
小檗堿%白血病細胞%凋亡%鼠雙微粒體2
소벽감%백혈병세포%조망%서쌍미립체2
Berberine%Leukemia cell%Apoptosis%Murine double minute 2
目的 探讨鼠双微粒体2(MDM2)在小檗碱诱导儿童急性淋巴细胞白血病EU-4细胞凋亡中的作用.方法 取对数生长期的EU-4细胞进行实验.终浓度为0、1、10、100 μmol/L小檗碱分别作用72 h后,流式细胞仪检测以上各组细胞凋亡情况,Western blot法检测以上各组细胞MDM2蛋白表达水平.100 μmol/L小檗碱分别作用0、24、48、72 h,采用实时荧光定量PCR法检测MDM2基因表达水平.使用终浓度为150 nmol/LMDM2小干扰RNA (siRNA)转染MDM2 siRNA组细胞,相同终浓度对照siRNA转染对照siRNA组细胞,48 h后采用流式细胞仪检测2组细胞凋亡情况.结果 经不同浓度小檗碱作用后,EU-4细胞凋亡率呈逐渐上升趋势,100 μmol/L小檗碱作用72 h后细胞凋亡率最高达(60.13±4.21)％,各组差异均有统计学意义(F=280.56,P＜0.05);MDM2蛋白表达水平则随小檗碱浓度上升逐渐降低,差异有统计学意义(F=73.82,P＜0.01).MDM2 mRNA表达水平随小檗碱作用时间延长逐渐降低,差异有统计学意义(F=45.37,P＜0.01).对照siRNA组及MDM2 siRNA组细胞凋亡率为(11.09±1.63)％和(29.84±1.75)％,2组比较差异有统计学意义(t=-13.57,P＜0.01).结论 小檗碱浓度和时间依赖地抑制MDM2的表达,可能是小檗碱诱导白血病细胞凋亡的机制之一.
目的 探討鼠雙微粒體2(MDM2)在小檗堿誘導兒童急性淋巴細胞白血病EU-4細胞凋亡中的作用.方法 取對數生長期的EU-4細胞進行實驗.終濃度為0、1、10、100 μmol/L小檗堿分彆作用72 h後,流式細胞儀檢測以上各組細胞凋亡情況,Western blot法檢測以上各組細胞MDM2蛋白錶達水平.100 μmol/L小檗堿分彆作用0、24、48、72 h,採用實時熒光定量PCR法檢測MDM2基因錶達水平.使用終濃度為150 nmol/LMDM2小榦擾RNA (siRNA)轉染MDM2 siRNA組細胞,相同終濃度對照siRNA轉染對照siRNA組細胞,48 h後採用流式細胞儀檢測2組細胞凋亡情況.結果 經不同濃度小檗堿作用後,EU-4細胞凋亡率呈逐漸上升趨勢,100 μmol/L小檗堿作用72 h後細胞凋亡率最高達(60.13±4.21)％,各組差異均有統計學意義(F=280.56,P＜0.05);MDM2蛋白錶達水平則隨小檗堿濃度上升逐漸降低,差異有統計學意義(F=73.82,P＜0.01).MDM2 mRNA錶達水平隨小檗堿作用時間延長逐漸降低,差異有統計學意義(F=45.37,P＜0.01).對照siRNA組及MDM2 siRNA組細胞凋亡率為(11.09±1.63)％和(29.84±1.75)％,2組比較差異有統計學意義(t=-13.57,P＜0.01).結論 小檗堿濃度和時間依賴地抑製MDM2的錶達,可能是小檗堿誘導白血病細胞凋亡的機製之一.
목적 탐토서쌍미립체2(MDM2)재소벽감유도인동급성림파세포백혈병EU-4세포조망중적작용.방법 취대수생장기적EU-4세포진행실험.종농도위0、1、10、100 μmol/L소벽감분별작용72 h후,류식세포의검측이상각조세포조망정황,Western blot법검측이상각조세포MDM2단백표체수평.100 μmol/L소벽감분별작용0、24、48、72 h,채용실시형광정량PCR법검측MDM2기인표체수평.사용종농도위150 nmol/LMDM2소간우RNA (siRNA)전염MDM2 siRNA조세포,상동종농도대조siRNA전염대조siRNA조세포,48 h후채용류식세포의검측2조세포조망정황.결과 경불동농도소벽감작용후,EU-4세포조망솔정축점상승추세,100 μmol/L소벽감작용72 h후세포조망솔최고체(60.13±4.21)％,각조차이균유통계학의의(F=280.56,P＜0.05);MDM2단백표체수평칙수소벽감농도상승축점강저,차이유통계학의의(F=73.82,P＜0.01).MDM2 mRNA표체수평수소벽감작용시간연장축점강저,차이유통계학의의(F=45.37,P＜0.01).대조siRNA조급MDM2 siRNA조세포조망솔위(11.09±1.63)％화(29.84±1.75)％,2조비교차이유통계학의의(t=-13.57,P＜0.01).결론 소벽감농도화시간의뢰지억제MDM2적표체,가능시소벽감유도백혈병세포조망적궤제지일.
