江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
6期
1399-1404
,共6页
李鹏成%孙冰%乔绪稳%郑其升%侯继波
李鵬成%孫冰%喬緒穩%鄭其升%侯繼波
리붕성%손빙%교서은%정기승%후계파
乳酸乳球菌%肽聚糖锚钩蛋白%原核表达
乳痠乳毬菌%肽聚糖錨鉤蛋白%原覈錶達
유산유구균%태취당묘구단백%원핵표체
Lactococcus lactis%peptidoglycan protein anchor%prokaryotic expression
以乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(Protein anchor,PA)为研究对象,构建原核表达载体并进行表达,以期获得PA融合蛋白.首先应用PCR技术扩增得到乳酸乳球菌PA基因片段;然后应用pET-32a(+)质粒构建原核表达载体,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,最后进行融合蛋白的纯化及锚定活性鉴定.结果显示:PA融合蛋白在大肠杆菌中获得表达,主要以包涵体形式存在;包涵体经纯化复性后的PA蛋白可与肽聚糖结合.说明乳酸乳球菌PA蛋白在大肠杆菌中可高效表达并具有锚定活性,为今后该蛋白多克隆抗体制备及与目的抗原的融合表达等相关研究奠定了基础.
以乳痠乳毬菌肽聚糖錨鉤蛋白(Protein anchor,PA)為研究對象,構建原覈錶達載體併進行錶達,以期穫得PA融閤蛋白.首先應用PCR技術擴增得到乳痠乳毬菌PA基因片段;然後應用pET-32a(+)質粒構建原覈錶達載體,將其轉化大腸桿菌BL-21(DE3),進行誘導錶達,最後進行融閤蛋白的純化及錨定活性鑒定.結果顯示:PA融閤蛋白在大腸桿菌中穫得錶達,主要以包涵體形式存在;包涵體經純化複性後的PA蛋白可與肽聚糖結閤.說明乳痠乳毬菌PA蛋白在大腸桿菌中可高效錶達併具有錨定活性,為今後該蛋白多剋隆抗體製備及與目的抗原的融閤錶達等相關研究奠定瞭基礎.
이유산유구균태취당묘구단백(Protein anchor,PA)위연구대상,구건원핵표체재체병진행표체,이기획득PA융합단백.수선응용PCR기술확증득도유산유구균PA기인편단;연후응용pET-32a(+)질립구건원핵표체재체,장기전화대장간균BL-21(DE3),진행유도표체,최후진행융합단백적순화급묘정활성감정.결과현시:PA융합단백재대장간균중획득표체,주요이포함체형식존재;포함체경순화복성후적PA단백가여태취당결합.설명유산유구균PA단백재대장간균중가고효표체병구유묘정활성,위금후해단백다극륭항체제비급여목적항원적융합표체등상관연구전정료기출.
