江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
6期
1297-1303
,共7页
常蕾%胡雪虹%杨郁文%陈天子%邓惠清%姜利农%刘正銮%张保龙%王荣富
常蕾%鬍雪虹%楊鬱文%陳天子%鄧惠清%薑利農%劉正鑾%張保龍%王榮富
상뢰%호설홍%양욱문%진천자%산혜청%강리농%류정란%장보룡%왕영부
烟粉虱%烟草%CYP6CM1%Coe1%RNAi%抗药性
煙粉虱%煙草%CYP6CM1%Coe1%RNAi%抗藥性
연분슬%연초%CYP6CM1%Coe1%RNAi%항약성
Bemisia tabaci%tobacco%CYP6CM1%Coe1%RNAi%resistance to insecticide
细胞色素P450酶系和羧酸酯酶在昆虫代谢抗药性中起重要作用,通过RNAi沉默昆虫这两种酶的基因,研究其对Q型烟粉虱抗药性的影响.根据Q型烟粉虱的一个P450基因(CYP6CM1)和一个羧酸酯酶基因(Coe1)的特异区域构建双价RNAi载体,农杆菌介导转化烟草,PCR检测获得5个单独的To代转基因株系.饲喂烟粉虱T1代转基因烟草,荧光定量PCR检测发现取食转基因烟草的烟粉虱体内CYP6CM1基因和Coe1基因表达量仅为取食非转基因烟草烟粉虱的18％ ～24％和17％～33％;通过琼脂保湿浸叶法和单株活体法研究取食T1代转基因烟草的烟粉虱对杀虫剂的效应,结果发现在接触1 g/L阿维·吡虫啉72 h后,2种方法中取食转基因烟草的烟粉虱死亡率分别比取食非转基因烟草的烟粉虱死亡率升高14.77％～16.46％和16.01％～18.51％;同样,接触稀释1 000倍的40％辛硫磷(体积比)72 h后,2种方法中烟粉虱死亡率升高22.94％ ～ 23.58％和17.4％～18.76％.以上结果表明,转CYP6CM1-Coe1 RNAi基因烟草可以显著降低烟粉虱CYP6CM1基因和Coe1基因的表达,降低烟粉虱对烟碱类杀虫剂阿维·吡虫啉和有机磷类杀虫剂辛硫磷的抗药性,显著提高杀虫剂的防治效果.
細胞色素P450酶繫和羧痠酯酶在昆蟲代謝抗藥性中起重要作用,通過RNAi沉默昆蟲這兩種酶的基因,研究其對Q型煙粉虱抗藥性的影響.根據Q型煙粉虱的一箇P450基因(CYP6CM1)和一箇羧痠酯酶基因(Coe1)的特異區域構建雙價RNAi載體,農桿菌介導轉化煙草,PCR檢測穫得5箇單獨的To代轉基因株繫.飼餵煙粉虱T1代轉基因煙草,熒光定量PCR檢測髮現取食轉基因煙草的煙粉虱體內CYP6CM1基因和Coe1基因錶達量僅為取食非轉基因煙草煙粉虱的18％ ～24％和17％～33％;通過瓊脂保濕浸葉法和單株活體法研究取食T1代轉基因煙草的煙粉虱對殺蟲劑的效應,結果髮現在接觸1 g/L阿維·吡蟲啉72 h後,2種方法中取食轉基因煙草的煙粉虱死亡率分彆比取食非轉基因煙草的煙粉虱死亡率升高14.77％～16.46％和16.01％～18.51％;同樣,接觸稀釋1 000倍的40％辛硫燐(體積比)72 h後,2種方法中煙粉虱死亡率升高22.94％ ～ 23.58％和17.4％～18.76％.以上結果錶明,轉CYP6CM1-Coe1 RNAi基因煙草可以顯著降低煙粉虱CYP6CM1基因和Coe1基因的錶達,降低煙粉虱對煙堿類殺蟲劑阿維·吡蟲啉和有機燐類殺蟲劑辛硫燐的抗藥性,顯著提高殺蟲劑的防治效果.
세포색소P450매계화최산지매재곤충대사항약성중기중요작용,통과RNAi침묵곤충저량충매적기인,연구기대Q형연분슬항약성적영향.근거Q형연분슬적일개P450기인(CYP6CM1)화일개최산지매기인(Coe1)적특이구역구건쌍개RNAi재체,농간균개도전화연초,PCR검측획득5개단독적To대전기인주계.사위연분슬T1대전기인연초,형광정량PCR검측발현취식전기인연초적연분슬체내CYP6CM1기인화Coe1기인표체량부위취식비전기인연초연분슬적18％ ～24％화17％～33％;통과경지보습침협법화단주활체법연구취식T1대전기인연초적연분슬대살충제적효응,결과발현재접촉1 g/L아유·필충람72 h후,2충방법중취식전기인연초적연분슬사망솔분별비취식비전기인연초적연분슬사망솔승고14.77％～16.46％화16.01％～18.51％;동양,접촉희석1 000배적40％신류린(체적비)72 h후,2충방법중연분슬사망솔승고22.94％ ～ 23.58％화17.4％～18.76％.이상결과표명,전CYP6CM1-Coe1 RNAi기인연초가이현저강저연분슬CYP6CM1기인화Coe1기인적표체,강저연분슬대연감류살충제아유·필충람화유궤린류살충제신류린적항약성,현저제고살충제적방치효과.
