华中科技大学学报(医学版)
華中科技大學學報(醫學版)
화중과기대학학보(의학판)
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2012年
5期
523-528
,共6页
禹虔%杨述华%冯勇%刘先哲%陈东%王小红%陈超
禹虔%楊述華%馮勇%劉先哲%陳東%王小紅%陳超
우건%양술화%풍용%류선철%진동%왕소홍%진초
间充质干细胞%趋化因子受体4%转化生长因子β1
間充質榦細胞%趨化因子受體4%轉化生長因子β1
간충질간세포%추화인자수체4%전화생장인자β1
目的 观察转化生长因子β1 (TGF-β1)短时间干预间充质干细胞(MSCs)后趋化因子受体4(CXCR4)的表达及对MSCs迁移能力的影响.方法 MSCs被不同浓度(0、0.01、0.1、1、10 ng/mL)和时间梯度(6、12、24、48 h)的TGF-β1干预后,采用流式细胞术鉴定MSCs细胞,通过Western blot和real-time quantitative PCR检测CXCR4的表达,并使用transwell小室实验来鉴定MSCs细胞的迁移能力.CXCR4基因的甲基化状态通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测.结果 将MSCs细胞短时间暴露在TGF-β1中会导致CXCR4的蛋白水平以浓度依赖性的方式升高,且随着干预时间的延长表达升高,于24 h时达到高峰;而此时,检测MSCs细胞暴露于TGF-β124 h这个时间点的CXCR4的mRNA水平,发现其以浓度依赖性的方式升高,而且MSCs的迁移能力增强,但MSP的结果显示CXCR4基因甲基化状态并未发生改变.结论 MSCs细胞经TGF-β1干预后,其CXCR4的表达增加,迁移能力增强.
目的 觀察轉化生長因子β1 (TGF-β1)短時間榦預間充質榦細胞(MSCs)後趨化因子受體4(CXCR4)的錶達及對MSCs遷移能力的影響.方法 MSCs被不同濃度(0、0.01、0.1、1、10 ng/mL)和時間梯度(6、12、24、48 h)的TGF-β1榦預後,採用流式細胞術鑒定MSCs細胞,通過Western blot和real-time quantitative PCR檢測CXCR4的錶達,併使用transwell小室實驗來鑒定MSCs細胞的遷移能力.CXCR4基因的甲基化狀態通過甲基化特異性PCR(methylation-specific PCR,MSP)檢測.結果 將MSCs細胞短時間暴露在TGF-β1中會導緻CXCR4的蛋白水平以濃度依賴性的方式升高,且隨著榦預時間的延長錶達升高,于24 h時達到高峰;而此時,檢測MSCs細胞暴露于TGF-β124 h這箇時間點的CXCR4的mRNA水平,髮現其以濃度依賴性的方式升高,而且MSCs的遷移能力增彊,但MSP的結果顯示CXCR4基因甲基化狀態併未髮生改變.結論 MSCs細胞經TGF-β1榦預後,其CXCR4的錶達增加,遷移能力增彊.
목적 관찰전화생장인자β1 (TGF-β1)단시간간예간충질간세포(MSCs)후추화인자수체4(CXCR4)적표체급대MSCs천이능력적영향.방법 MSCs피불동농도(0、0.01、0.1、1、10 ng/mL)화시간제도(6、12、24、48 h)적TGF-β1간예후,채용류식세포술감정MSCs세포,통과Western blot화real-time quantitative PCR검측CXCR4적표체,병사용transwell소실실험래감정MSCs세포적천이능력.CXCR4기인적갑기화상태통과갑기화특이성PCR(methylation-specific PCR,MSP)검측.결과 장MSCs세포단시간폭로재TGF-β1중회도치CXCR4적단백수평이농도의뢰성적방식승고,차수착간예시간적연장표체승고,우24 h시체도고봉;이차시,검측MSCs세포폭로우TGF-β124 h저개시간점적CXCR4적mRNA수평,발현기이농도의뢰성적방식승고,이차MSCs적천이능력증강,단MSP적결과현시CXCR4기인갑기화상태병미발생개변.결론 MSCs세포경TGF-β1간예후,기CXCR4적표체증가,천이능력증강.