甘肃农业大学学报
甘肅農業大學學報
감숙농업대학학보
JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
5期
12-17
,共6页
管宏伟%吴润%赵春林%刁小龙%罗鹏%何轶群
管宏偉%吳潤%趙春林%刁小龍%囉鵬%何軼群
관굉위%오윤%조춘림%조소룡%라붕%하질군
禽白血病病毒%多重PCR检测%核苷酸
禽白血病病毒%多重PCR檢測%覈苷痠
금백혈병병독%다중PCR검측%핵감산
根据GenBank中登录的禽白血病病毒A、B、J亚群的核苷酸序列设计合成了3对引物,各对引物可分别扩增出大小约为195、260、924 bp的核苷酸片段;经优化建立禽白血病病毒多重PCR检测法,并进行其敏感性试验及对马立克病病毒(MDV)、火鸡疱疹病毒(HVT)、新城疫病毒(NDV)、传染性囊病病毒(IBDV)、传染性喉气管炎病毒(ILTV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和DF-1细胞基因组的特异性试验;应用该方法对1294份临床样品进行禽白血病病毒检测,对阳性检出样品抽样进行测序鉴定.结果表明:该方法的最小检出拷贝数为103,特异性试验均为阴性,检出临床样品中的核苷酸片段与参考毒株核苷酸序列的同源性达98%以上,符合率100%,具有良好的特异性、敏感性和符合率,可为禽白血病病毒感染的临床诊断及流行病学调查研究提供有效借鉴.
根據GenBank中登錄的禽白血病病毒A、B、J亞群的覈苷痠序列設計閤成瞭3對引物,各對引物可分彆擴增齣大小約為195、260、924 bp的覈苷痠片段;經優化建立禽白血病病毒多重PCR檢測法,併進行其敏感性試驗及對馬立剋病病毒(MDV)、火鷄皰疹病毒(HVT)、新城疫病毒(NDV)、傳染性囊病病毒(IBDV)、傳染性喉氣管炎病毒(ILTV)、傳染性支氣管炎病毒(IBV)和DF-1細胞基因組的特異性試驗;應用該方法對1294份臨床樣品進行禽白血病病毒檢測,對暘性檢齣樣品抽樣進行測序鑒定.結果錶明:該方法的最小檢齣拷貝數為103,特異性試驗均為陰性,檢齣臨床樣品中的覈苷痠片段與參攷毒株覈苷痠序列的同源性達98%以上,符閤率100%,具有良好的特異性、敏感性和符閤率,可為禽白血病病毒感染的臨床診斷及流行病學調查研究提供有效藉鑒.
근거GenBank중등록적금백혈병병독A、B、J아군적핵감산서렬설계합성료3대인물,각대인물가분별확증출대소약위195、260、924 bp적핵감산편단;경우화건립금백혈병병독다중PCR검측법,병진행기민감성시험급대마립극병병독(MDV)、화계포진병독(HVT)、신성역병독(NDV)、전염성낭병병독(IBDV)、전염성후기관염병독(ILTV)、전염성지기관염병독(IBV)화DF-1세포기인조적특이성시험;응용해방법대1294빈림상양품진행금백혈병병독검측,대양성검출양품추양진행측서감정.결과표명:해방법적최소검출고패수위103,특이성시험균위음성,검출림상양품중적핵감산편단여삼고독주핵감산서렬적동원성체98%이상,부합솔100%,구유량호적특이성、민감성화부합솔,가위금백혈병병독감염적림상진단급류행병학조사연구제공유효차감.