甘肃农业大学学报
甘肅農業大學學報
감숙농업대학학보
JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
5期
109-114,128
,共7页
王庭辉%马晖玲%史毅%安惠惠
王庭輝%馬暉玲%史毅%安惠惠
왕정휘%마휘령%사의%안혜혜
陇东苜蓿%茎尖生长点转化%漩涡振荡
隴東苜蓿%莖尖生長點轉化%漩渦振盪
롱동목숙%경첨생장점전화%선와진탕
以‘陇东苜蓿’茎尖生长点为受体材料,利用农杆菌介导法并结合漩涡振荡,将双元基因溶菌酶(Lyz)与绿色荧光蛋白( GFP)导入其中,并对转化过程中的干扰因素和适宜条件进行了研究.结果表明:70mg/L的卡那霉素对陇东苜蓿转化植株的生长具有抑制效应;250mg/L头孢霉素能够有效地抑制农杆菌LBA4404的生长;‘陇东苜蓿’茎尖生长点经携有pBI121-Lyz-GFP的农杆菌LBA4404(D600值0.5~0.6)漩涡振荡侵染30 min,培养4~5 d后,转化材料生长良好,其转化率为24.47%.试验成功获得了含有该双元基因的‘陇东苜蓿’转基因植株,通过荧光检测和PCR扩增分析,转化植株有较强的荧光表达和GFP基因片段.
以‘隴東苜蓿’莖尖生長點為受體材料,利用農桿菌介導法併結閤漩渦振盪,將雙元基因溶菌酶(Lyz)與綠色熒光蛋白( GFP)導入其中,併對轉化過程中的榦擾因素和適宜條件進行瞭研究.結果錶明:70mg/L的卡那黴素對隴東苜蓿轉化植株的生長具有抑製效應;250mg/L頭孢黴素能夠有效地抑製農桿菌LBA4404的生長;‘隴東苜蓿’莖尖生長點經攜有pBI121-Lyz-GFP的農桿菌LBA4404(D600值0.5~0.6)漩渦振盪侵染30 min,培養4~5 d後,轉化材料生長良好,其轉化率為24.47%.試驗成功穫得瞭含有該雙元基因的‘隴東苜蓿’轉基因植株,通過熒光檢測和PCR擴增分析,轉化植株有較彊的熒光錶達和GFP基因片段.
이‘롱동목숙’경첨생장점위수체재료,이용농간균개도법병결합선와진탕,장쌍원기인용균매(Lyz)여록색형광단백( GFP)도입기중,병대전화과정중적간우인소화괄의조건진행료연구.결과표명:70mg/L적잡나매소대롱동목숙전화식주적생장구유억제효응;250mg/L두포매소능구유효지억제농간균LBA4404적생장;‘롱동목숙’경첨생장점경휴유pBI121-Lyz-GFP적농간균LBA4404(D600치0.5~0.6)선와진탕침염30 min,배양4~5 d후,전화재료생장량호,기전화솔위24.47%.시험성공획득료함유해쌍원기인적‘롱동목숙’전기인식주,통과형광검측화PCR확증분석,전화식주유교강적형광표체화GFP기인편단.