浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2012年
6期
1045-1049
,共5页
邓衍福%陈芝娟%程晓非%章鹏程%胡凤%施农农
鄧衍福%陳芝娟%程曉非%章鵬程%鬍鳳%施農農
산연복%진지연%정효비%장붕정%호봉%시농농
蝴蝶兰%建兰花叶病毒%原核表达%Western blot
蝴蝶蘭%建蘭花葉病毒%原覈錶達%Western blot
호접란%건란화협병독%원핵표체%Western blot
建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)是严重危害兰科植物的主要病毒之一.本研究根据NCBI登录序列号(AB197937)的CymMV-TGBI,-TGB2基因分别设计特异性引物,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从感染CymMV蝴蝶兰病叶中扩增TGB1,TGB2基因,并将目的基因插入pGEX-4T3中,构建相应的原核表达载体.将表达载体转入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后成功表达出目的蛋白；SDS-PAGE及Western blot检测证实目的蛋白分别是融合GST的CymMV TGB1和TGB2蛋白.两个蛋白的表达为下一步抗体制备以深入开展CymMV TGB1和TGB2功能研究奠定了基础.
建蘭花葉病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV)是嚴重危害蘭科植物的主要病毒之一.本研究根據NCBI登錄序列號(AB197937)的CymMV-TGBI,-TGB2基因分彆設計特異性引物,採用逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)方法從感染CymMV蝴蝶蘭病葉中擴增TGB1,TGB2基因,併將目的基因插入pGEX-4T3中,構建相應的原覈錶達載體.將錶達載體轉入大腸桿菌BL21,經IPTG誘導後成功錶達齣目的蛋白；SDS-PAGE及Western blot檢測證實目的蛋白分彆是融閤GST的CymMV TGB1和TGB2蛋白.兩箇蛋白的錶達為下一步抗體製備以深入開展CymMV TGB1和TGB2功能研究奠定瞭基礎.
건란화협병독(Cymbidium mosaic virus,CymMV)시엄중위해란과식물적주요병독지일.본연구근거NCBI등록서렬호(AB197937)적CymMV-TGBI,-TGB2기인분별설계특이성인물,채용역전록취합매련식반응(RT-PCR)방법종감염CymMV호접란병협중확증TGB1,TGB2기인,병장목적기인삽입pGEX-4T3중,구건상응적원핵표체재체.장표체재체전입대장간균BL21,경IPTG유도후성공표체출목적단백；SDS-PAGE급Western blot검측증실목적단백분별시융합GST적CymMV TGB1화TGB2단백.량개단백적표체위하일보항체제비이심입개전CymMV TGB1화TGB2공능연구전정료기출.
