中华老年心脑血管病杂志
中華老年心腦血管病雜誌
중화노년심뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF GERIATRIC CARDIOVASCULAR AND CEREBROVASCULAR DISEASES
2012年
9期
971-976
,共6页
张亭%任延平%张明娟%黄若文
張亭%任延平%張明娟%黃若文
장정%임연평%장명연%황약문
脐静脉%内皮细胞%细胞衰老%细胞膜%RNA,信使%钠钾交换ATP酶%基因表达
臍靜脈%內皮細胞%細胞衰老%細胞膜%RNA,信使%鈉鉀交換ATP酶%基因錶達
제정맥%내피세포%세포쇠로%세포막%RNA,신사%납갑교환ATP매%기인표체
目的 探讨体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)衰老过程中,细胞膜表面钠泵α亚单位各异构体基因表达的改变.方法 提取原代HUVEC,体外传代培养,第1代起分组干预.实验分对照组(未干预)和干预组(D-半乳糖10 g/L干预),按细胞传代的不同代数,观察第2、5和8代细胞形态,于不同群体倍增数(PD)行β-半乳糖苷酶染色初步判定细胞衰老,利用免疫细胞荧光染色法、实时定量PCR法和Western blot法检测各组细胞膜表面钠泵α1、α2、和α3亚单位mRNA及蛋白的表达水平.结果 钠泵α1、α2和α3亚单位mRNA及蛋白表达水平随PD增加而降低(P＜0.01);与对照组比较,干预组同一PD钠泵α2和α3亚单位mRNA和蛋白表达降低(P＜0.01),而2组α1亚单位表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 细胞膜表面钠泵α亚单位mRNA及蛋白表达水平的失衡,可能是HUVEC复制性衰老的分子机制之一;D-半乳糖诱导可能构建HUVEC亚急性衰老模型.
目的 探討體外培養的人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)衰老過程中,細胞膜錶麵鈉泵α亞單位各異構體基因錶達的改變.方法 提取原代HUVEC,體外傳代培養,第1代起分組榦預.實驗分對照組(未榦預)和榦預組(D-半乳糖10 g/L榦預),按細胞傳代的不同代數,觀察第2、5和8代細胞形態,于不同群體倍增數(PD)行β-半乳糖苷酶染色初步判定細胞衰老,利用免疫細胞熒光染色法、實時定量PCR法和Western blot法檢測各組細胞膜錶麵鈉泵α1、α2、和α3亞單位mRNA及蛋白的錶達水平.結果 鈉泵α1、α2和α3亞單位mRNA及蛋白錶達水平隨PD增加而降低(P＜0.01);與對照組比較,榦預組同一PD鈉泵α2和α3亞單位mRNA和蛋白錶達降低(P＜0.01),而2組α1亞單位錶達差異無統計學意義(P＞0.05).結論 細胞膜錶麵鈉泵α亞單位mRNA及蛋白錶達水平的失衡,可能是HUVEC複製性衰老的分子機製之一;D-半乳糖誘導可能構建HUVEC亞急性衰老模型.
목적 탐토체외배양적인제정맥내피세포(HUVEC)쇠로과정중,세포막표면납빙α아단위각이구체기인표체적개변.방법 제취원대HUVEC,체외전대배양,제1대기분조간예.실험분대조조(미간예)화간예조(D-반유당10 g/L간예),안세포전대적불동대수,관찰제2、5화8대세포형태,우불동군체배증수(PD)행β-반유당감매염색초보판정세포쇠로,이용면역세포형광염색법、실시정량PCR법화Western blot법검측각조세포막표면납빙α1、α2、화α3아단위mRNA급단백적표체수평.결과 납빙α1、α2화α3아단위mRNA급단백표체수평수PD증가이강저(P＜0.01);여대조조비교,간예조동일PD납빙α2화α3아단위mRNA화단백표체강저(P＜0.01),이2조α1아단위표체차이무통계학의의(P＞0.05).결론 세포막표면납빙α아단위mRNA급단백표체수평적실형,가능시HUVEC복제성쇠로적분자궤제지일;D-반유당유도가능구건HUVEC아급성쇠로모형.
