CAJ | 학술논문

狗蔷薇不定根可被噻苯隆(TDZ)高效诱导形成类原球茎,深入探讨其诱导阶段的分子生物学机制,有利于指导切花月季建立类似高效再生和遗传转化体系.快速、准确克隆和筛选狗蔷薇类原球茎发生的关键基因是进行分子生物学水平研究的一个重要前提.利用苹果(Malus×domestica)、桃(Prunus persica)和草莓(Fragaria vesca)高同源性基因5'UTR(非翻译区)的相对保守性,在其内保守区域设计上游简并引物,以M-MLV逆转录酶反转录合成cDNA为模板,直接扩增蔷薇科植物狗蔷薇(Rosa canina)RcPIN1(pin-formed)和RcPLT(plethora)基因5’末端,大大减少了获取众多目的基因全长的时间及成本.结果显示,在狗蔷薇RcPIN1和RcPLT基因与其对应苹果、桃和草莓高同源性基因的5'UTR内,很多区域表现出较高保守性,表明在5'UTR相对保守区域设计上游简并引物扩增目的基因5’末端的合理性.与常规5'CDNA末端快速扩增技术(5’RACE)相比,本方法无需对cDNA模板5’末端加尾同聚物和引入锚定引物,即不必使用昂贵的5’RACE试剂盒,具有快捷、节约等优点,是一种获取蔷薇科植物基因5'末端的可行途径.
구장미불정근가피새분륭(TDZ)고효유도형성류원구경,심입탐토기유도계단적분자생물학궤제,유리우지도절화월계건립유사고효재생화유전전화체계.쾌속、준학극륭화사선구장미류원구경발생적관건기인시진행분자생물학수평연구적일개중요전제.이용평과(Malus×domestica)、도(Prunus persica)화초매(Fragaria vesca)고동원성기인5'UTR(비번역구)적상대보수성,재기내보수구역설계상유간병인물,이M-MLV역전록매반전록합성cDNA위모판,직접확증장미과식물구장미(Rosa canina)RcPIN1(pin-formed)화RcPLT(plethora)기인5’말단,대대감소료획취음다목적기인전장적시간급성본.결과현시,재구장미RcPIN1화RcPLT기인여기대응평과、도화초매고동원성기인적5'UTR내,흔다구역표현출교고보수성,표명재5'UTR상대보수구역설계상유간병인물확증목적기인5’말단적합이성.여상규5'CDNA말단쾌속확증기술(5’RACE)상비,본방법무수대cDNA모판5’말단가미동취물화인입묘정인물,즉불필사용앙귀적5’RACE시제합,구유쾌첩、절약등우점,시일충획취장미과식물기인5'말단적가행도경.