农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2012年
10期
1117-1125
,共9页
韩清%冯淼%刘辰%马宁%沈火林
韓清%馮淼%劉辰%馬寧%瀋火林
한청%풍묘%류신%마저%침화림
辣椒%核不育%cDNA-AFLP%差异表达%转录衍生片段
辣椒%覈不育%cDNA-AFLP%差異錶達%轉錄衍生片段
랄초%핵불육%cDNA-AFLP%차이표체%전록연생편단
利用辣椒雄性不育生产杂交种取得了重大进展,但有关雄性不育的分子机制仍不清晰.本研究利用cDNA-AFLP技术,比较分析了辣椒(Capsicum annuum L.)核雄性不育两用系中不育植株与可育植株花药发育过程中基因表达的差异.用1024对选择性扩增引物进行筛选,共获得了168个转录衍生片段(transcript-derived fragment,TDFs).通过BLAST比对,多数TDFs未找到对应的同源序列,可能代表了新基因;48个TDFs在数据库中找到了同源序列(GenBank登录号:JK993564~JK993611),对这些序列进行功能分类,差异表达的基因涉及基础代谢(25%)、胁迫反应(4.2%)、转录调控(14.6%)、信号转导(6.3%)、植物发育(10.4%)等多方面的功能.对其中24条TDFs进行半定量RT-PCR检测,分析其在可育株和不育株不同组织及花药发育不同时期的表达模式,结果表明11条TDFs有时空表达特异性,推测和雄性不育相关.其中TDF14和TDF21为花药特异表达,TDF39只在可育花药及可育株和不育株的萼片中特异表达.以上研究为揭示辣椒核不育的分子调控机理提供理论依据,同时为后续的分子辅助育种和育性相关基因的克隆提供基础资料.
利用辣椒雄性不育生產雜交種取得瞭重大進展,但有關雄性不育的分子機製仍不清晰.本研究利用cDNA-AFLP技術,比較分析瞭辣椒(Capsicum annuum L.)覈雄性不育兩用繫中不育植株與可育植株花藥髮育過程中基因錶達的差異.用1024對選擇性擴增引物進行篩選,共穫得瞭168箇轉錄衍生片段(transcript-derived fragment,TDFs).通過BLAST比對,多數TDFs未找到對應的同源序列,可能代錶瞭新基因;48箇TDFs在數據庫中找到瞭同源序列(GenBank登錄號:JK993564~JK993611),對這些序列進行功能分類,差異錶達的基因涉及基礎代謝(25%)、脅迫反應(4.2%)、轉錄調控(14.6%)、信號轉導(6.3%)、植物髮育(10.4%)等多方麵的功能.對其中24條TDFs進行半定量RT-PCR檢測,分析其在可育株和不育株不同組織及花藥髮育不同時期的錶達模式,結果錶明11條TDFs有時空錶達特異性,推測和雄性不育相關.其中TDF14和TDF21為花藥特異錶達,TDF39隻在可育花藥及可育株和不育株的萼片中特異錶達.以上研究為揭示辣椒覈不育的分子調控機理提供理論依據,同時為後續的分子輔助育種和育性相關基因的剋隆提供基礎資料.
이용랄초웅성불육생산잡교충취득료중대진전,단유관웅성불육적분자궤제잉불청석.본연구이용cDNA-AFLP기술,비교분석료랄초(Capsicum annuum L.)핵웅성불육량용계중불육식주여가육식주화약발육과정중기인표체적차이.용1024대선택성확증인물진행사선,공획득료168개전록연생편단(transcript-derived fragment,TDFs).통과BLAST비대,다수TDFs미조도대응적동원서렬,가능대표료신기인;48개TDFs재수거고중조도료동원서렬(GenBank등록호:JK993564~JK993611),대저사서렬진행공능분류,차이표체적기인섭급기출대사(25%)、협박반응(4.2%)、전록조공(14.6%)、신호전도(6.3%)、식물발육(10.4%)등다방면적공능.대기중24조TDFs진행반정량RT-PCR검측,분석기재가육주화불육주불동조직급화약발육불동시기적표체모식,결과표명11조TDFs유시공표체특이성,추측화웅성불육상관.기중TDF14화TDF21위화약특이표체,TDF39지재가육화약급가육주화불육주적악편중특이표체.이상연구위게시랄초핵불육적분자조공궤리제공이론의거,동시위후속적분자보조육충화육성상관기인적극륭제공기출자료.