中西医结合肝病杂志
中西醫結閤肝病雜誌
중서의결합간병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE ON LIVER DISEASES
2014年
2期
96-100
,共5页
韩梅芳%张元亚%王宏艳%陈广%宁琴
韓梅芳%張元亞%王宏豔%陳廣%寧琴
한매방%장원아%왕굉염%진엄%저금
基因调控%转录因子c-Ets-2%短发夹状双链核糖核酸干扰%促凝活性
基因調控%轉錄因子c-Ets-2%短髮夾狀雙鏈覈糖覈痠榦擾%促凝活性
기인조공%전록인자c-Ets-2%단발협상쌍련핵당핵산간우%촉응활성
gene regulation%transcription factor c-Ets-2%shRNA interference%procoagulant activity (PCA)
目的:构建转录因子c-Ets-2的短发夹状双链RNA (shRNA)干扰质粒,验证其对转录因子c-Ets-2表达的干扰效果,并研究转录因子c-Ets-2对人凝血酶原酶(hfgl2)基因表达及细胞促凝活性的影响.方法:采用基因克隆方法构建c-Ets-2 shRNA干扰质粒,并使用酶切鉴定方法和测序进行证实.使用实时荧光定量逆转录PCR (qRTPCR)和Western blot方法对干扰效果进行验证.并进一步采用该质粒与HBV病毒蛋白表达质粒共转染单核细胞系THP-1,研究c-Ets-2 shRNA干扰质粒对hfgl2基因转录表达的影响和对细胞促凝活性的作用.结果:c-Ets-2 shRNA干扰质粒构建成功,可下调转录因子c-Ets-2 mRNA和蛋白水平的表达.当与HBx病毒蛋白表达质粒共转染时,该干扰质粒可抑制hfgl2基因的转录,降低细胞的促凝活性.结论:转录因子c-Ets-2与凝血级联途径有关,参与了重型肝炎和肝细胞癌等疾病的发生发展.
目的:構建轉錄因子c-Ets-2的短髮夾狀雙鏈RNA (shRNA)榦擾質粒,驗證其對轉錄因子c-Ets-2錶達的榦擾效果,併研究轉錄因子c-Ets-2對人凝血酶原酶(hfgl2)基因錶達及細胞促凝活性的影響.方法:採用基因剋隆方法構建c-Ets-2 shRNA榦擾質粒,併使用酶切鑒定方法和測序進行證實.使用實時熒光定量逆轉錄PCR (qRTPCR)和Western blot方法對榦擾效果進行驗證.併進一步採用該質粒與HBV病毒蛋白錶達質粒共轉染單覈細胞繫THP-1,研究c-Ets-2 shRNA榦擾質粒對hfgl2基因轉錄錶達的影響和對細胞促凝活性的作用.結果:c-Ets-2 shRNA榦擾質粒構建成功,可下調轉錄因子c-Ets-2 mRNA和蛋白水平的錶達.噹與HBx病毒蛋白錶達質粒共轉染時,該榦擾質粒可抑製hfgl2基因的轉錄,降低細胞的促凝活性.結論:轉錄因子c-Ets-2與凝血級聯途徑有關,參與瞭重型肝炎和肝細胞癌等疾病的髮生髮展.
목적:구건전록인자c-Ets-2적단발협상쌍련RNA (shRNA)간우질립,험증기대전록인자c-Ets-2표체적간우효과,병연구전록인자c-Ets-2대인응혈매원매(hfgl2)기인표체급세포촉응활성적영향.방법:채용기인극륭방법구건c-Ets-2 shRNA간우질립,병사용매절감정방법화측서진행증실.사용실시형광정량역전록PCR (qRTPCR)화Western blot방법대간우효과진행험증.병진일보채용해질립여HBV병독단백표체질립공전염단핵세포계THP-1,연구c-Ets-2 shRNA간우질립대hfgl2기인전록표체적영향화대세포촉응활성적작용.결과:c-Ets-2 shRNA간우질립구건성공,가하조전록인자c-Ets-2 mRNA화단백수평적표체.당여HBx병독단백표체질립공전염시,해간우질립가억제hfgl2기인적전록,강저세포적촉응활성.결론:전록인자c-Ets-2여응혈급련도경유관,삼여료중형간염화간세포암등질병적발생발전.
