畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
11期
1716-1722
,共7页
占思远%罗万伟%程波%蒋婧%李利%王林杰%张红平%王永%龚华斌%邓中宝
佔思遠%囉萬偉%程波%蔣婧%李利%王林傑%張紅平%王永%龔華斌%鄧中寶
점사원%라만위%정파%장청%리리%왕림걸%장홍평%왕영%공화빈%산중보
山羊%clock基因%cry1基因%分子克隆%实时荧光定量PCR%组织表达
山羊%clock基因%cry1基因%分子剋隆%實時熒光定量PCR%組織錶達
산양%clock기인%cry1기인%분자극륭%실시형광정량PCR%조직표체
本研究旨在探讨生物钟基因clock和cry1在山羊出生后不同时期的大脑和垂体中的表达差异.在出生后30、60、90和120 d共屠宰24只南江黄羊羔羊(公母各l2只),取其大脑皮质层和垂体组织样品用于抽提RNA,进行分子克隆和实时荧光定量PCR分析.结果,分离克隆得到了山羊clock基因外显子1到外显子8以及cry1基因外显子6到外显子15的CDS区序列,其长度分别为1479 bp和993 bp,其中clock基因部分CDS区序列与绵羊、牛、人和小鼠的对应序列相似性分别为99％、90％、94％和92％,cry1基因部分CDS区序列与绵羊、牛、人和小鼠的对应序列相似性分别为99％、98％、94％和87％.组织表达分析结果表明,性别对clock和cry1基因的表达影响不显著(P＞0.05),2个基因在垂体中的mRNA表达量极显著高于大脑中的表达量(P＜0.01) ;在不同时期的垂体组织中,clock和cry1基因表达量均呈现先上升后下降的趋势 ;在不同时期的大脑组织中,clock基因的表达量趋于波动平衡,呈现上升趋势,cry1基因的相对表达量呈细微的上升趋势.结果提示:clock和cry1基因的CDS区在物种间保守性较高.clock和cry1基因在山羊大脑和垂体组织中起到重要的作用,且其mRNA发育性表达模式具有组织特异性.
本研究旨在探討生物鐘基因clock和cry1在山羊齣生後不同時期的大腦和垂體中的錶達差異.在齣生後30、60、90和120 d共屠宰24隻南江黃羊羔羊(公母各l2隻),取其大腦皮質層和垂體組織樣品用于抽提RNA,進行分子剋隆和實時熒光定量PCR分析.結果,分離剋隆得到瞭山羊clock基因外顯子1到外顯子8以及cry1基因外顯子6到外顯子15的CDS區序列,其長度分彆為1479 bp和993 bp,其中clock基因部分CDS區序列與綿羊、牛、人和小鼠的對應序列相似性分彆為99％、90％、94％和92％,cry1基因部分CDS區序列與綿羊、牛、人和小鼠的對應序列相似性分彆為99％、98％、94％和87％.組織錶達分析結果錶明,性彆對clock和cry1基因的錶達影響不顯著(P＞0.05),2箇基因在垂體中的mRNA錶達量極顯著高于大腦中的錶達量(P＜0.01) ;在不同時期的垂體組織中,clock和cry1基因錶達量均呈現先上升後下降的趨勢 ;在不同時期的大腦組織中,clock基因的錶達量趨于波動平衡,呈現上升趨勢,cry1基因的相對錶達量呈細微的上升趨勢.結果提示:clock和cry1基因的CDS區在物種間保守性較高.clock和cry1基因在山羊大腦和垂體組織中起到重要的作用,且其mRNA髮育性錶達模式具有組織特異性.
본연구지재탐토생물종기인clock화cry1재산양출생후불동시기적대뇌화수체중적표체차이.재출생후30、60、90화120 d공도재24지남강황양고양(공모각l2지),취기대뇌피질층화수체조직양품용우추제RNA,진행분자극륭화실시형광정량PCR분석.결과,분리극륭득도료산양clock기인외현자1도외현자8이급cry1기인외현자6도외현자15적CDS구서렬,기장도분별위1479 bp화993 bp,기중clock기인부분CDS구서렬여면양、우、인화소서적대응서렬상사성분별위99％、90％、94％화92％,cry1기인부분CDS구서렬여면양、우、인화소서적대응서렬상사성분별위99％、98％、94％화87％.조직표체분석결과표명,성별대clock화cry1기인적표체영향불현저(P＞0.05),2개기인재수체중적mRNA표체량겁현저고우대뇌중적표체량(P＜0.01) ;재불동시기적수체조직중,clock화cry1기인표체량균정현선상승후하강적추세 ;재불동시기적대뇌조직중,clock기인적표체량추우파동평형,정현상승추세,cry1기인적상대표체량정세미적상승추세.결과제시:clock화cry1기인적CDS구재물충간보수성교고.clock화cry1기인재산양대뇌화수체조직중기도중요적작용,차기mRNA발육성표체모식구유조직특이성.
