中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
30期
1-5
,共5页
杨靓%邓萍%王开放%刘妍%刘小娟%吴祖建
楊靚%鄧萍%王開放%劉妍%劉小娟%吳祖建
양정%산평%왕개방%류연%류소연%오조건
水稻草状矮缩病毒%P2基因%原核表达%多克隆抗体
水稻草狀矮縮病毒%P2基因%原覈錶達%多剋隆抗體
수도초상왜축병독%P2기인%원핵표체%다극륭항체
为了进行水稻草状矮缩病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)诊断方法和蛋白功能研究.通过RT-PCR方法从感染RGSV的水稻中克隆该病毒的P2基因,并将此基因片段重组到原核表达载体pDEST17上.将重组载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导后获得分子量约为29 kDa含HIS标签的融合蛋白.以诱导的融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔获得多克隆抗体,经酶联免疫检测发现其效价达到1:8192.并用制备的抗体建立了特异、灵敏的检测RGSV的IC-RT-PCR和Dot-blot ELISA方法,为该病毒的检测、诊断提供了保障,同时也为P2蛋白的结构和功能研究奠定了基础.
為瞭進行水稻草狀矮縮病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)診斷方法和蛋白功能研究.通過RT-PCR方法從感染RGSV的水稻中剋隆該病毒的P2基因,併將此基因片段重組到原覈錶達載體pDEST17上.將重組載體轉化E.coli Rosetta,經IPTG誘導後穫得分子量約為29 kDa含HIS標籤的融閤蛋白.以誘導的融閤蛋白為抗原,免疫新西蘭大耳白兔穫得多剋隆抗體,經酶聯免疫檢測髮現其效價達到1:8192.併用製備的抗體建立瞭特異、靈敏的檢測RGSV的IC-RT-PCR和Dot-blot ELISA方法,為該病毒的檢測、診斷提供瞭保障,同時也為P2蛋白的結構和功能研究奠定瞭基礎.
위료진행수도초상왜축병독(Rice grassy stunt virus,RGSV)진단방법화단백공능연구.통과RT-PCR방법종감염RGSV적수도중극륭해병독적P2기인,병장차기인편단중조도원핵표체재체pDEST17상.장중조재체전화E.coli Rosetta,경IPTG유도후획득분자량약위29 kDa함HIS표첨적융합단백.이유도적융합단백위항원,면역신서란대이백토획득다극륭항체,경매련면역검측발현기효개체도1:8192.병용제비적항체건립료특이、령민적검측RGSV적IC-RT-PCR화Dot-blot ELISA방법,위해병독적검측、진단제공료보장,동시야위P2단백적결구화공능연구전정료기출.
