实用预防医学
實用預防醫學
실용예방의학
PRACTICAL PREVENTIVE MEDICINE
2013年
12期
1419-1422
,共4页
孙卫国%金程燕%李邦印%张灵霞%刘艳华%程小星
孫衛國%金程燕%李邦印%張靈霞%劉豔華%程小星
손위국%금정연%리방인%장령하%류염화%정소성
巨细胞病毒%gp52蛋白%DsbC蛋白%可溶性表达
巨細胞病毒%gp52蛋白%DsbC蛋白%可溶性錶達
거세포병독%gp52단백%DsbC단백%가용성표체
HCMV%Protein gp52%Protein DsbC%Soluble Expression
目的 生物工程方法在原核系统内可溶性表达巨细胞病毒gp52蛋白并进行纯化,获得可以用于检测巨细胞病毒特异性抗体的重组抗原. 方法 利用PCR扩增获得巨细胞病毒gp52核酸序列,然后克隆至pET-DsbC核融合表达载体中,在原核系统进行诱导表达并纯化,用Western blot和ELISA检测其抗原性及实用性. 结果 表达纯化的Ds-bC-gp52融合蛋白分别经酶标记建立IgM捕获ELISA方法,检测60份抗巨细胞病毒IgM阳性血清和60份阴性血清.其中用酶标记DsbC-gp52蛋白建立的捕获ELISA法阳性检出率达96.6％,阴性检出率100％. 结论 融合蛋白DsbC-gp52在大肠杆菌中主要以可溶性表达形式存在,获得的高纯度融合蛋白抗原性和特异性强,利用其建立的IgM捕获ELISA方法,可用于临床检测风疹病毒的早期感染.
目的 生物工程方法在原覈繫統內可溶性錶達巨細胞病毒gp52蛋白併進行純化,穫得可以用于檢測巨細胞病毒特異性抗體的重組抗原. 方法 利用PCR擴增穫得巨細胞病毒gp52覈痠序列,然後剋隆至pET-DsbC覈融閤錶達載體中,在原覈繫統進行誘導錶達併純化,用Western blot和ELISA檢測其抗原性及實用性. 結果 錶達純化的Ds-bC-gp52融閤蛋白分彆經酶標記建立IgM捕穫ELISA方法,檢測60份抗巨細胞病毒IgM暘性血清和60份陰性血清.其中用酶標記DsbC-gp52蛋白建立的捕穫ELISA法暘性檢齣率達96.6％,陰性檢齣率100％. 結論 融閤蛋白DsbC-gp52在大腸桿菌中主要以可溶性錶達形式存在,穫得的高純度融閤蛋白抗原性和特異性彊,利用其建立的IgM捕穫ELISA方法,可用于臨床檢測風疹病毒的早期感染.
목적 생물공정방법재원핵계통내가용성표체거세포병독gp52단백병진행순화,획득가이용우검측거세포병독특이성항체적중조항원. 방법 이용PCR확증획득거세포병독gp52핵산서렬,연후극륭지pET-DsbC핵융합표체재체중,재원핵계통진행유도표체병순화,용Western blot화ELISA검측기항원성급실용성. 결과 표체순화적Ds-bC-gp52융합단백분별경매표기건립IgM포획ELISA방법,검측60빈항거세포병독IgM양성혈청화60빈음성혈청.기중용매표기DsbC-gp52단백건립적포획ELISA법양성검출솔체96.6％,음성검출솔100％. 결론 융합단백DsbC-gp52재대장간균중주요이가용성표체형식존재,획득적고순도융합단백항원성화특이성강,이용기건립적IgM포획ELISA방법,가용우림상검측풍진병독적조기감염.
