基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
3期
335-340
,共6页
成洁%邹丽莉%段进丹%孙伟
成潔%鄒麗莉%段進丹%孫偉
성길%추려리%단진단%손위
蛋白质组%超声辅助酶切%溶液内酶切
蛋白質組%超聲輔助酶切%溶液內酶切
단백질조%초성보조매절%용액내매절
目的 分析超声辅助酶切法对溶液内蛋白质样品酶切的特点.方法 分别应用超声辅助酶切法与传统酶切法对牛血清白蛋白进行溶液内酶切,通过飞行时间质谱进行分析,对数据库检索后得到的多肽进行比较分析.结果 超声辅助酶切法的酶切时间可缩短到10 min,酶切后多肽的回收率比传统酶切法低8％,但飞行时间质谱鉴定评分(MASCOT评分)比传统方法高约1倍,肽段的覆盖率高10％,匹配的多肽数多40％以上.对超声辅助酶切法鉴定出的多肽进一步分析表明,这些多肽的误切率较传统方法高22％,比传统方法多鉴定出的多肽分子质量主要在2 ～3 ku之间,且大部分为含有误切位点的多肽.结论 超声辅助酶切可明显缩短蛋白质酶切时间,得到更好的多肽鉴定,但部分多肽酶切不完全,样品损失会更多.
目的 分析超聲輔助酶切法對溶液內蛋白質樣品酶切的特點.方法 分彆應用超聲輔助酶切法與傳統酶切法對牛血清白蛋白進行溶液內酶切,通過飛行時間質譜進行分析,對數據庫檢索後得到的多肽進行比較分析.結果 超聲輔助酶切法的酶切時間可縮短到10 min,酶切後多肽的迴收率比傳統酶切法低8％,但飛行時間質譜鑒定評分(MASCOT評分)比傳統方法高約1倍,肽段的覆蓋率高10％,匹配的多肽數多40％以上.對超聲輔助酶切法鑒定齣的多肽進一步分析錶明,這些多肽的誤切率較傳統方法高22％,比傳統方法多鑒定齣的多肽分子質量主要在2 ～3 ku之間,且大部分為含有誤切位點的多肽.結論 超聲輔助酶切可明顯縮短蛋白質酶切時間,得到更好的多肽鑒定,但部分多肽酶切不完全,樣品損失會更多.
목적 분석초성보조매절법대용액내단백질양품매절적특점.방법 분별응용초성보조매절법여전통매절법대우혈청백단백진행용액내매절,통과비행시간질보진행분석,대수거고검색후득도적다태진행비교분석.결과 초성보조매절법적매절시간가축단도10 min,매절후다태적회수솔비전통매절법저8％,단비행시간질보감정평분(MASCOT평분)비전통방법고약1배,태단적복개솔고10％,필배적다태수다40％이상.대초성보조매절법감정출적다태진일보분석표명,저사다태적오절솔교전통방법고22％,비전통방법다감정출적다태분자질량주요재2 ～3 ku지간,차대부분위함유오절위점적다태.결론 초성보조매절가명현축단단백질매절시간,득도경호적다태감정,단부분다태매절불완전,양품손실회경다.
