基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
3期
308-313
,共6页
罗宏%苏吉儿%韩松%李俊发
囉宏%囌吉兒%韓鬆%李俊髮
라굉%소길인%한송%리준발
低氧预适应(HPC)%氧糖剥夺(OGD)%细胞凋亡%细胞自噬%细胞坏死
低氧預適應(HPC)%氧糖剝奪(OGD)%細胞凋亡%細胞自噬%細胞壞死
저양예괄응(HPC)%양당박탈(OGD)%세포조망%세포자서%세포배사
目的 在离体细胞水平,探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)对抗小鼠成神经瘤细胞(N2a)氧糖剥夺(OGD)损伤中作用及其可能的细胞分子机制.方法 建立N2a细胞HPC和OGD模型,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、原位末端标记(TUNEL)和蛋白印迹(Western blot)几种方法,分别检测N2a细胞损伤、坏死、凋亡和自噬水平.结果 OGD2和4h可使N2a细胞的生存率显著降低、死亡率明显增高(P ＜0.05,n=6)；HPC(20 min)明显改善OGD 3 h对N2a细胞的损伤作用,而cPKCγ抑制剂Go6983(6 nmoL/L)则显著解除HPC对OGD细胞的保护作用(P ＜0.05,n=16);OGD3h明显增加N2a细胞的凋亡数目(P＜0.05,n=6),但HPC和Go6983+ HPC均不能明显影响OGD细胞凋亡水平；OGD 3 h显著提高N2a细胞的自噬水平,Go6983和HPC+ Go6983均可明显降低OGD细胞的自噬水平(P ＜0.05,n=6),而HPC则对OGD细胞的自噬水平无明显影响；HPC明显改善OGD 3 h致N2a细胞坏死的程度,而Go6983则可解除HPC的保护作用(P＜0.05,n=16).结论 在离体细胞水平证实了cPKCγ在HPC改善N2a细胞OGD损伤中的作用,且这种作用主要与降低OGD细胞的坏死水平有关.
目的 在離體細胞水平,探討經典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧預適應(HPC)對抗小鼠成神經瘤細胞(N2a)氧糖剝奪(OGD)損傷中作用及其可能的細胞分子機製.方法 建立N2a細胞HPC和OGD模型,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT)比色法、乳痠脫氫酶(LDH)漏齣率、原位末耑標記(TUNEL)和蛋白印跡(Western blot)幾種方法,分彆檢測N2a細胞損傷、壞死、凋亡和自噬水平.結果 OGD2和4h可使N2a細胞的生存率顯著降低、死亡率明顯增高(P ＜0.05,n=6)；HPC(20 min)明顯改善OGD 3 h對N2a細胞的損傷作用,而cPKCγ抑製劑Go6983(6 nmoL/L)則顯著解除HPC對OGD細胞的保護作用(P ＜0.05,n=16);OGD3h明顯增加N2a細胞的凋亡數目(P＜0.05,n=6),但HPC和Go6983+ HPC均不能明顯影響OGD細胞凋亡水平；OGD 3 h顯著提高N2a細胞的自噬水平,Go6983和HPC+ Go6983均可明顯降低OGD細胞的自噬水平(P ＜0.05,n=6),而HPC則對OGD細胞的自噬水平無明顯影響；HPC明顯改善OGD 3 h緻N2a細胞壞死的程度,而Go6983則可解除HPC的保護作用(P＜0.05,n=16).結論 在離體細胞水平證實瞭cPKCγ在HPC改善N2a細胞OGD損傷中的作用,且這種作用主要與降低OGD細胞的壞死水平有關.
목적 재리체세포수평,탐토경전형단백격매Cγ(cPKCγ)재저양예괄응(HPC)대항소서성신경류세포(N2a)양당박탈(OGD)손상중작용급기가능적세포분자궤제.방법 건립N2a세포HPC화OGD모형,용3-(4,5-이갑기새서-2)-2,5-이분기사담서추염(MTT)비색법、유산탈경매(LDH)루출솔、원위말단표기(TUNEL)화단백인적(Western blot)궤충방법,분별검측N2a세포손상、배사、조망화자서수평.결과 OGD2화4h가사N2a세포적생존솔현저강저、사망솔명현증고(P ＜0.05,n=6)；HPC(20 min)명현개선OGD 3 h대N2a세포적손상작용,이cPKCγ억제제Go6983(6 nmoL/L)칙현저해제HPC대OGD세포적보호작용(P ＜0.05,n=16);OGD3h명현증가N2a세포적조망수목(P＜0.05,n=6),단HPC화Go6983+ HPC균불능명현영향OGD세포조망수평；OGD 3 h현저제고N2a세포적자서수평,Go6983화HPC+ Go6983균가명현강저OGD세포적자서수평(P ＜0.05,n=6),이HPC칙대OGD세포적자서수평무명현영향；HPC명현개선OGD 3 h치N2a세포배사적정도,이Go6983칙가해제HPC적보호작용(P＜0.05,n=16).결론 재리체세포수평증실료cPKCγ재HPC개선N2a세포OGD손상중적작용,차저충작용주요여강저OGD세포적배사수평유관.
