基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
3期
303-307
,共5页
郭佳%田洲%顾娜%徐珩%闾军
郭佳%田洲%顧娜%徐珩%閭軍
곽가%전주%고나%서형%려군
TCR%PBMC%电转%NY-ESO-1
TCR%PBMC%電轉%NY-ESO-1
TCR%PBMC%전전%NY-ESO-1
目的 探讨体外转导NY-ESO-1特异性T细胞受体至人外周血淋巴细胞中,是否可增强转导后细胞体外特异性识别并杀伤肿瘤细胞的能力.方法 将NY-ESO-1特异性TCR质粒(pCDNA3.1-ESO-TCR)体外电转入新分离的正常人PBMC中,RT-PCR法鉴定转导是否成功；采用流式细胞仪分析转导后PBMC表型；用特异性NY-ESO-1b抗原肽(p157-165)刺激转导PBMC后,用ELISPOT法检测PBMC分泌IFN-γ的能力,用实时无标记动态细胞分析仪检测PBMC特异性细胞毒性作用.结果 电转后PBMC能够扩增出特异性TCR片段；电转pCDNA3.1-ESO-TCR质粒的PBMC细胞表面特异性TCR表达率高于电转空载体的PBMC的表达率(P＜0.05)；经多肽刺激后,电转目的质粒的PBMC分泌IFN-γ的斑点数明显多于电转空载体的PBMC(P ＜0.05)；转导后PBMC特异性细胞毒性作用明显强于电转空载体的PBMC.结论 经NY-ESO-1特异性TCR基因修饰的PBMC对NY-ESO-1阳性HepG2细胞的体外特异性杀伤作用有明显提高,为进行下一步肝癌过继性免疫研究提供了基础资料.
目的 探討體外轉導NY-ESO-1特異性T細胞受體至人外週血淋巴細胞中,是否可增彊轉導後細胞體外特異性識彆併殺傷腫瘤細胞的能力.方法 將NY-ESO-1特異性TCR質粒(pCDNA3.1-ESO-TCR)體外電轉入新分離的正常人PBMC中,RT-PCR法鑒定轉導是否成功；採用流式細胞儀分析轉導後PBMC錶型；用特異性NY-ESO-1b抗原肽(p157-165)刺激轉導PBMC後,用ELISPOT法檢測PBMC分泌IFN-γ的能力,用實時無標記動態細胞分析儀檢測PBMC特異性細胞毒性作用.結果 電轉後PBMC能夠擴增齣特異性TCR片段；電轉pCDNA3.1-ESO-TCR質粒的PBMC細胞錶麵特異性TCR錶達率高于電轉空載體的PBMC的錶達率(P＜0.05)；經多肽刺激後,電轉目的質粒的PBMC分泌IFN-γ的斑點數明顯多于電轉空載體的PBMC(P ＜0.05)；轉導後PBMC特異性細胞毒性作用明顯彊于電轉空載體的PBMC.結論 經NY-ESO-1特異性TCR基因脩飾的PBMC對NY-ESO-1暘性HepG2細胞的體外特異性殺傷作用有明顯提高,為進行下一步肝癌過繼性免疫研究提供瞭基礎資料.
목적 탐토체외전도NY-ESO-1특이성T세포수체지인외주혈림파세포중,시부가증강전도후세포체외특이성식별병살상종류세포적능력.방법 장NY-ESO-1특이성TCR질립(pCDNA3.1-ESO-TCR)체외전전입신분리적정상인PBMC중,RT-PCR법감정전도시부성공；채용류식세포의분석전도후PBMC표형；용특이성NY-ESO-1b항원태(p157-165)자격전도PBMC후,용ELISPOT법검측PBMC분비IFN-γ적능력,용실시무표기동태세포분석의검측PBMC특이성세포독성작용.결과 전전후PBMC능구확증출특이성TCR편단；전전pCDNA3.1-ESO-TCR질립적PBMC세포표면특이성TCR표체솔고우전전공재체적PBMC적표체솔(P＜0.05)；경다태자격후,전전목적질립적PBMC분비IFN-γ적반점수명현다우전전공재체적PBMC(P ＜0.05)；전도후PBMC특이성세포독성작용명현강우전전공재체적PBMC.결론 경NY-ESO-1특이성TCR기인수식적PBMC대NY-ESO-1양성HepG2세포적체외특이성살상작용유명현제고,위진행하일보간암과계성면역연구제공료기출자료.
