基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
1期
82-87
,共6页
成永霞%刘贵波%颜彬%冯玉宽%郭素芬%王宏伟%杨向红
成永霞%劉貴波%顏彬%馮玉寬%郭素芬%王宏偉%楊嚮紅
성영하%류귀파%안빈%풍옥관%곽소분%왕굉위%양향홍
糖基化终末产物%心脏微血管内皮细胞%一氧化氮%内皮型一氧化氮合酶%PKC/NADPH%LY33531%DPI
糖基化終末產物%心髒微血管內皮細胞%一氧化氮%內皮型一氧化氮閤酶%PKC/NADPH%LY33531%DPI
당기화종말산물%심장미혈관내피세포%일양화담%내피형일양화담합매%PKC/NADPH%LY33531%DPI
目的 观察体外原代培养大鼠心脏微血管内皮细胞内PKC/NADPH氧化应激途径在eNOS脱偶联中的作用.方法 用牛血清白蛋白糖基化终末产物(BSA-AGEs)(100 mg/L)与LY33531(PKC抑制剂)和DPI(NADPH抑制剂)分别作用大鼠心脏微血管内皮细胞(24 h),HPLC法检测BH4,试剂盒检测NO和O2-生成,免疫组化检测eNOS蛋白表达,Western blot法检测P47phox蛋白表达.结果 随着LY33531和DPI浓度(5、10和20 μmol/L)的增加,eNOS脱偶联状态减轻:NO生成逐渐增加(90.7 ±0.3～122.6 ±0.3,160.6 ±0.6,P＜0.05),而O2-生成逐渐减少(P＜0.05),eNOS表达逐渐减少(126.1 ±3.5 ～ 112.6±1.7,114.4 ±1.8,P＜0.05),而BH4含量逐渐增加(P＜0.05).同时,ROS表达和P47phox表达减少(P＜0.05).结论 NADPH氧化应激途径可能参与AGEs诱导的心脏微血管内皮细胞eNOS脱偶联的发生.而AGEs诱导的心脏微血管内皮细胞内NADPH氧化应激的发生是依赖PKC激活的.
目的 觀察體外原代培養大鼠心髒微血管內皮細胞內PKC/NADPH氧化應激途徑在eNOS脫偶聯中的作用.方法 用牛血清白蛋白糖基化終末產物(BSA-AGEs)(100 mg/L)與LY33531(PKC抑製劑)和DPI(NADPH抑製劑)分彆作用大鼠心髒微血管內皮細胞(24 h),HPLC法檢測BH4,試劑盒檢測NO和O2-生成,免疫組化檢測eNOS蛋白錶達,Western blot法檢測P47phox蛋白錶達.結果 隨著LY33531和DPI濃度(5、10和20 μmol/L)的增加,eNOS脫偶聯狀態減輕:NO生成逐漸增加(90.7 ±0.3～122.6 ±0.3,160.6 ±0.6,P＜0.05),而O2-生成逐漸減少(P＜0.05),eNOS錶達逐漸減少(126.1 ±3.5 ～ 112.6±1.7,114.4 ±1.8,P＜0.05),而BH4含量逐漸增加(P＜0.05).同時,ROS錶達和P47phox錶達減少(P＜0.05).結論 NADPH氧化應激途徑可能參與AGEs誘導的心髒微血管內皮細胞eNOS脫偶聯的髮生.而AGEs誘導的心髒微血管內皮細胞內NADPH氧化應激的髮生是依賴PKC激活的.
목적 관찰체외원대배양대서심장미혈관내피세포내PKC/NADPH양화응격도경재eNOS탈우련중적작용.방법 용우혈청백단백당기화종말산물(BSA-AGEs)(100 mg/L)여LY33531(PKC억제제)화DPI(NADPH억제제)분별작용대서심장미혈관내피세포(24 h),HPLC법검측BH4,시제합검측NO화O2-생성,면역조화검측eNOS단백표체,Western blot법검측P47phox단백표체.결과 수착LY33531화DPI농도(5、10화20 μmol/L)적증가,eNOS탈우련상태감경:NO생성축점증가(90.7 ±0.3～122.6 ±0.3,160.6 ±0.6,P＜0.05),이O2-생성축점감소(P＜0.05),eNOS표체축점감소(126.1 ±3.5 ～ 112.6±1.7,114.4 ±1.8,P＜0.05),이BH4함량축점증가(P＜0.05).동시,ROS표체화P47phox표체감소(P＜0.05).결론 NADPH양화응격도경가능삼여AGEs유도적심장미혈관내피세포eNOS탈우련적발생.이AGEs유도적심장미혈관내피세포내NADPH양화응격적발생시의뢰PKC격활적.
