北京医学
北京醫學
북경의학
BEIJING MEDICAL JOURNAL
2013年
3期
200-203
,共4页
魏飞力%乔录新%李庆%石英%陈德喜
魏飛力%喬錄新%李慶%石英%陳德喜
위비력%교록신%리경%석영%진덕희
乙型肝炎病毒%HBV复制子%HepG2%瞬时转染
乙型肝炎病毒%HBV複製子%HepG2%瞬時轉染
을형간염병독%HBV복제자%HepG2%순시전염
目的 构建乙型肝炎病毒(HBV)复制表达载体,验证其在HepG2细胞系中的复制和表达.方法 通过引物设计合成,以实验室构建的HBV C1亚型质粒通过PCR、酶切、克隆等分子生物学技术,构建HBV复制表达载体.利用转染试剂(Fugene HD Transfection Reagent)将载体质粒导入HepG2细胞,分别检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)和HBV DNA在不同时间点的表达.结果 酶切和测序结果均证实载体构建成功,通过瞬时转染细胞证实培养上清液中可检测到HBsAg、HBeAg和HBV DNA.结论 利用分子克隆技术成功构建了HBV复制表达载体,可以在HepG2细胞系中复制表达.通过进一步改造,可以为HBV表型耐药以及复制活性研究提供支持.
目的 構建乙型肝炎病毒(HBV)複製錶達載體,驗證其在HepG2細胞繫中的複製和錶達.方法 通過引物設計閤成,以實驗室構建的HBV C1亞型質粒通過PCR、酶切、剋隆等分子生物學技術,構建HBV複製錶達載體.利用轉染試劑(Fugene HD Transfection Reagent)將載體質粒導入HepG2細胞,分彆檢測乙型肝炎錶麵抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)和HBV DNA在不同時間點的錶達.結果 酶切和測序結果均證實載體構建成功,通過瞬時轉染細胞證實培養上清液中可檢測到HBsAg、HBeAg和HBV DNA.結論 利用分子剋隆技術成功構建瞭HBV複製錶達載體,可以在HepG2細胞繫中複製錶達.通過進一步改造,可以為HBV錶型耐藥以及複製活性研究提供支持.
목적 구건을형간염병독(HBV)복제표체재체,험증기재HepG2세포계중적복제화표체.방법 통과인물설계합성,이실험실구건적HBV C1아형질립통과PCR、매절、극륭등분자생물학기술,구건HBV복제표체재체.이용전염시제(Fugene HD Transfection Reagent)장재체질립도입HepG2세포,분별검측을형간염표면항원(HBsAg)、을형간염e항원(HBeAg)화HBV DNA재불동시간점적표체.결과 매절화측서결과균증실재체구건성공,통과순시전염세포증실배양상청액중가검측도HBsAg、HBeAg화HBV DNA.결론 이용분자극륭기술성공구건료HBV복제표체재체,가이재HepG2세포계중복제표체.통과진일보개조,가이위HBV표형내약이급복제활성연구제공지지.
