基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
2期
161-165
,共5页
孙文静%陈沅%张芬%陈露%陈妙月%耿雪静%朱高慧
孫文靜%陳沅%張芬%陳露%陳妙月%耿雪靜%硃高慧
손문정%진원%장분%진로%진묘월%경설정%주고혜
BMP-13%C3H10T1/2细胞%P38 MAPK%RNA干扰%SB203580
BMP-13%C3H10T1/2細胞%P38 MAPK%RNA榦擾%SB203580
BMP-13%C3H10T1/2세포%P38 MAPK%RNA간우%SB203580
目的 探讨P38 MAPK对BMP-13诱导C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化的影响.方法 实验共4个部分,分组如下:1)BMP-13腺病毒(Ad-BMP-13)对P38 MAPK的作用:Ad-BMP-13转染组、Ad-GFP转染组和C3H10空白组.Western blot检测磷酸化P38 MAPK(p-P38 MAPK)和总P38 MAPK(t-P38 MAPK)的表达变化,免疫荧光技术定位p-P38 MAPK;2)P38 MAPK干扰腺病毒(Ad-si-P38)对P38 MAPK的作用:si-P38干扰组、si-NC干扰对照组和C3H10空白组.Western blot检测t-P38 MAPK的表达；3)Ad-si-P38阻断P38 MAPK后对BMP-13诱导分化的影响:si-P38+ Ad-BMP-13转染组、si-NC+ Ad-BMP-13转染组、si-NC+ Ad-GFP转染组和C3H10空白组.Western blot检测cTnT和Cx43的表达,荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达；4)SB203580阻断P38 MAPK后对BMP-13诱导分化的影响:DMSO+ Ad-BMP-13转染组、SB203580(2、5和10 μmol/L)+Ad-BMP-13转染组.荧光定量PCR检测GATA-4和MEF-2C的mRNA表达.结果 BMP-13促进P38 MAPK的磷酸化.Ad-si-P38可以有效降低P38 MAPK表达水平.Ad-si-P38阻断P38 MAPK后BMP-13诱导组cTnT、Cx43表达有明显降低(P＜0.05),GATA-4和MEF-2C的表达也有显著降低(P＜0.05).随P38 MAPK特异性抑制剂SB203580浓度增加,BMP-13诱导组GATA-4和MEF-2C的表达降低(P＜0.05).结论 Ad-BMP-13可以通过激活P38 MAPK信号通路来调控C3H10T1/2细胞向心肌样细胞分化.
目的 探討P38 MAPK對BMP-13誘導C3H10T1/2細胞嚮心肌樣細胞分化的影響.方法 實驗共4箇部分,分組如下:1)BMP-13腺病毒(Ad-BMP-13)對P38 MAPK的作用:Ad-BMP-13轉染組、Ad-GFP轉染組和C3H10空白組.Western blot檢測燐痠化P38 MAPK(p-P38 MAPK)和總P38 MAPK(t-P38 MAPK)的錶達變化,免疫熒光技術定位p-P38 MAPK;2)P38 MAPK榦擾腺病毒(Ad-si-P38)對P38 MAPK的作用:si-P38榦擾組、si-NC榦擾對照組和C3H10空白組.Western blot檢測t-P38 MAPK的錶達；3)Ad-si-P38阻斷P38 MAPK後對BMP-13誘導分化的影響:si-P38+ Ad-BMP-13轉染組、si-NC+ Ad-BMP-13轉染組、si-NC+ Ad-GFP轉染組和C3H10空白組.Western blot檢測cTnT和Cx43的錶達,熒光定量PCR檢測GATA-4和MEF-2C的mRNA錶達；4)SB203580阻斷P38 MAPK後對BMP-13誘導分化的影響:DMSO+ Ad-BMP-13轉染組、SB203580(2、5和10 μmol/L)+Ad-BMP-13轉染組.熒光定量PCR檢測GATA-4和MEF-2C的mRNA錶達.結果 BMP-13促進P38 MAPK的燐痠化.Ad-si-P38可以有效降低P38 MAPK錶達水平.Ad-si-P38阻斷P38 MAPK後BMP-13誘導組cTnT、Cx43錶達有明顯降低(P＜0.05),GATA-4和MEF-2C的錶達也有顯著降低(P＜0.05).隨P38 MAPK特異性抑製劑SB203580濃度增加,BMP-13誘導組GATA-4和MEF-2C的錶達降低(P＜0.05).結論 Ad-BMP-13可以通過激活P38 MAPK信號通路來調控C3H10T1/2細胞嚮心肌樣細胞分化.
목적 탐토P38 MAPK대BMP-13유도C3H10T1/2세포향심기양세포분화적영향.방법 실험공4개부분,분조여하:1)BMP-13선병독(Ad-BMP-13)대P38 MAPK적작용:Ad-BMP-13전염조、Ad-GFP전염조화C3H10공백조.Western blot검측린산화P38 MAPK(p-P38 MAPK)화총P38 MAPK(t-P38 MAPK)적표체변화,면역형광기술정위p-P38 MAPK;2)P38 MAPK간우선병독(Ad-si-P38)대P38 MAPK적작용:si-P38간우조、si-NC간우대조조화C3H10공백조.Western blot검측t-P38 MAPK적표체；3)Ad-si-P38조단P38 MAPK후대BMP-13유도분화적영향:si-P38+ Ad-BMP-13전염조、si-NC+ Ad-BMP-13전염조、si-NC+ Ad-GFP전염조화C3H10공백조.Western blot검측cTnT화Cx43적표체,형광정량PCR검측GATA-4화MEF-2C적mRNA표체；4)SB203580조단P38 MAPK후대BMP-13유도분화적영향:DMSO+ Ad-BMP-13전염조、SB203580(2、5화10 μmol/L)+Ad-BMP-13전염조.형광정량PCR검측GATA-4화MEF-2C적mRNA표체.결과 BMP-13촉진P38 MAPK적린산화.Ad-si-P38가이유효강저P38 MAPK표체수평.Ad-si-P38조단P38 MAPK후BMP-13유도조cTnT、Cx43표체유명현강저(P＜0.05),GATA-4화MEF-2C적표체야유현저강저(P＜0.05).수P38 MAPK특이성억제제SB203580농도증가,BMP-13유도조GATA-4화MEF-2C적표체강저(P＜0.05).결론 Ad-BMP-13가이통과격활P38 MAPK신호통로래조공C3H10T1/2세포향심기양세포분화.
