基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
4期
434-438
,共5页
焦杨%班克臣%孔晓龙%冯娴婧
焦楊%班剋臣%孔曉龍%馮嫻婧
초양%반극신%공효룡%풍한청
原代肝细胞%P70S6K%ERK1/2%PPARγ%雷帕霉素%U0126
原代肝細胞%P70S6K%ERK1/2%PPARγ%雷帕黴素%U0126
원대간세포%P70S6K%ERK1/2%PPARγ%뢰파매소%U0126
目的 研究乙醇对原代肝细胞中P70S6K和ERK1/2活性的影响.方法 分离成年雄性SD大鼠的肝细胞,分别以0、50、100和200 mmol/L的乙醇处理4 h,或以200 mmol/L乙醇处理0、1、2和4h,用Western blot法检测P70S6K 和ERK1/2的活性.在细胞中加入100 nmol/L的mTOR特异抑制剂雷帕霉素或10 μmol/L的MEK1/2特异抑制剂U0126,培养24 h后收集细胞,用Western blot法检测P70S6K、ERK1/2及PPARγ的表达；用EMSA检测PPARγ的活性.结果 随着乙醇浓度的增加或处理时间的延长,P70S6K的表达逐渐降低；乙醇也可抑制ERK1/2的活性；U0126同时抑制ERK1/2和P70S6K的活性,而雷帕霉素虽抑制P70S6K的活性,但增强ERK1/2的活性；乙醇不影响PPARγ的表达和活性.结论 在大鼠原代肝细胞,乙醇对P70S6K的活性有抑制作用,且存在量效关系和时效关系.P70S6K的活性受ERK1/2的控制,但P70S6K也可反向调节ERK1/2.
目的 研究乙醇對原代肝細胞中P70S6K和ERK1/2活性的影響.方法 分離成年雄性SD大鼠的肝細胞,分彆以0、50、100和200 mmol/L的乙醇處理4 h,或以200 mmol/L乙醇處理0、1、2和4h,用Western blot法檢測P70S6K 和ERK1/2的活性.在細胞中加入100 nmol/L的mTOR特異抑製劑雷帕黴素或10 μmol/L的MEK1/2特異抑製劑U0126,培養24 h後收集細胞,用Western blot法檢測P70S6K、ERK1/2及PPARγ的錶達；用EMSA檢測PPARγ的活性.結果 隨著乙醇濃度的增加或處理時間的延長,P70S6K的錶達逐漸降低；乙醇也可抑製ERK1/2的活性；U0126同時抑製ERK1/2和P70S6K的活性,而雷帕黴素雖抑製P70S6K的活性,但增彊ERK1/2的活性；乙醇不影響PPARγ的錶達和活性.結論 在大鼠原代肝細胞,乙醇對P70S6K的活性有抑製作用,且存在量效關繫和時效關繫.P70S6K的活性受ERK1/2的控製,但P70S6K也可反嚮調節ERK1/2.
목적 연구을순대원대간세포중P70S6K화ERK1/2활성적영향.방법 분리성년웅성SD대서적간세포,분별이0、50、100화200 mmol/L적을순처리4 h,혹이200 mmol/L을순처리0、1、2화4h,용Western blot법검측P70S6K 화ERK1/2적활성.재세포중가입100 nmol/L적mTOR특이억제제뢰파매소혹10 μmol/L적MEK1/2특이억제제U0126,배양24 h후수집세포,용Western blot법검측P70S6K、ERK1/2급PPARγ적표체；용EMSA검측PPARγ적활성.결과 수착을순농도적증가혹처리시간적연장,P70S6K적표체축점강저；을순야가억제ERK1/2적활성；U0126동시억제ERK1/2화P70S6K적활성,이뢰파매소수억제P70S6K적활성,단증강ERK1/2적활성；을순불영향PPARγ적표체화활성.결론 재대서원대간세포,을순대P70S6K적활성유억제작용,차존재량효관계화시효관계.P70S6K적활성수ERK1/2적공제,단P70S6K야가반향조절ERK1/2.
