基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
6期
661-665
,共5页
曹蓓蓓%胡燕%段金虹%许丹科%王琛%杨先达
曹蓓蓓%鬍燕%段金虹%許丹科%王琛%楊先達
조배배%호연%단금홍%허단과%왕침%양선체
适配体%SELEX%IFN-γ
適配體%SELEX%IFN-γ
괄배체%SELEX%IFN-γ
aptamer%SELEX%IFN-γ
目的 研发能特异性结合干扰素-γ(IFN-γ)的DNA适配体,为发展IFN-γ的新型检测技术提供基础.方法 体外合成全长为59个碱基并含有21个随机寡核苷酸的单链DNA文库,以IFN-γ蛋白为靶标,利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX),从单链DNA文库中筛选能够选择性结合IFN-γ蛋白的核酸适配体；流式细胞术检测富集进度、适配体与IFN-γ蛋白结合特性；MFold软件预测二级结构.结果 经多轮筛选获得了能够识别IFN-γ蛋白的DNA适配体B3-8,其能够选择性地结合IFN-γ蛋白,而与血清白蛋白的结合较弱.经检测其Kd值为185 nmol/L.结论 DNA适配体B3-8能选择性地识别IFN-γ蛋白,在研发针对IFN-γ的新型检测技术方面具有应用潜能.
目的 研髮能特異性結閤榦擾素-γ(IFN-γ)的DNA適配體,為髮展IFN-γ的新型檢測技術提供基礎.方法 體外閤成全長為59箇堿基併含有21箇隨機寡覈苷痠的單鏈DNA文庫,以IFN-γ蛋白為靶標,利用指數富集的配體繫統進化技術(SELEX),從單鏈DNA文庫中篩選能夠選擇性結閤IFN-γ蛋白的覈痠適配體；流式細胞術檢測富集進度、適配體與IFN-γ蛋白結閤特性；MFold軟件預測二級結構.結果 經多輪篩選穫得瞭能夠識彆IFN-γ蛋白的DNA適配體B3-8,其能夠選擇性地結閤IFN-γ蛋白,而與血清白蛋白的結閤較弱.經檢測其Kd值為185 nmol/L.結論 DNA適配體B3-8能選擇性地識彆IFN-γ蛋白,在研髮針對IFN-γ的新型檢測技術方麵具有應用潛能.
목적 연발능특이성결합간우소-γ(IFN-γ)적DNA괄배체,위발전IFN-γ적신형검측기술제공기출.방법 체외합성전장위59개감기병함유21개수궤과핵감산적단련DNA문고,이IFN-γ단백위파표,이용지수부집적배체계통진화기술(SELEX),종단련DNA문고중사선능구선택성결합IFN-γ단백적핵산괄배체；류식세포술검측부집진도、괄배체여IFN-γ단백결합특성；MFold연건예측이급결구.결과 경다륜사선획득료능구식별IFN-γ단백적DNA괄배체B3-8,기능구선택성지결합IFN-γ단백,이여혈청백단백적결합교약.경검측기Kd치위185 nmol/L.결론 DNA괄배체B3-8능선택성지식별IFN-γ단백,재연발침대IFN-γ적신형검측기술방면구유응용잠능.
