基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
6期
648-654
,共7页
刘慧丰%杨巍巍%高华%杨慧
劉慧豐%楊巍巍%高華%楊慧
류혜봉%양외외%고화%양혜
自噬%MN9D细胞%鱼藤酮%3-MA
自噬%MN9D細胞%魚籐酮%3-MA
자서%MN9D세포%어등동%3-MA
autophagy%MN9D cells%rotenone%3-M
目的 探讨DJ-1对MN9D细胞的保护作用及具体机制.方法 在MN9D细胞中瞬时转染DJ-l质粒,利用MTT法及流式细胞术分别检测MN9D细胞活力与凋亡水平.通过激光共聚焦显微镜(confocal)观察LC3自噬点数量.利用Western blot法检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值.结果 过表达DJ-1能部分恢复鱼藤酮引起的细胞活力下降(P＜0.05)且可以减少鱼藤酮引起的MN9D细胞凋亡(P＜0.05).过表达DJ-1增加了鱼藤酮处理的MN9D细胞内荧光点的数量(P＜0.001)且使LC3Ⅱ/Ⅰ的比值显著增高(P＜0.001),应用3-MA干预后,细胞内荧光点数量回落到基础水平,且LC3Ⅱ/Ⅰ的比值明显降低(P＜0.05).同时应用自噬抑制剂3-MA干预后,DJ-1的细胞保护作用消失.结论 DJ-1通过激活自噬,起保护作用能减轻鱼藤酮引起的毒性.
目的 探討DJ-1對MN9D細胞的保護作用及具體機製.方法 在MN9D細胞中瞬時轉染DJ-l質粒,利用MTT法及流式細胞術分彆檢測MN9D細胞活力與凋亡水平.通過激光共聚焦顯微鏡(confocal)觀察LC3自噬點數量.利用Western blot法檢測LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值.結果 過錶達DJ-1能部分恢複魚籐酮引起的細胞活力下降(P＜0.05)且可以減少魚籐酮引起的MN9D細胞凋亡(P＜0.05).過錶達DJ-1增加瞭魚籐酮處理的MN9D細胞內熒光點的數量(P＜0.001)且使LC3Ⅱ/Ⅰ的比值顯著增高(P＜0.001),應用3-MA榦預後,細胞內熒光點數量迴落到基礎水平,且LC3Ⅱ/Ⅰ的比值明顯降低(P＜0.05).同時應用自噬抑製劑3-MA榦預後,DJ-1的細胞保護作用消失.結論 DJ-1通過激活自噬,起保護作用能減輕魚籐酮引起的毒性.
목적 탐토DJ-1대MN9D세포적보호작용급구체궤제.방법 재MN9D세포중순시전염DJ-l질립,이용MTT법급류식세포술분별검측MN9D세포활력여조망수평.통과격광공취초현미경(confocal)관찰LC3자서점수량.이용Western blot법검측LC3Ⅱ/LC3Ⅰ적비치.결과 과표체DJ-1능부분회복어등동인기적세포활력하강(P＜0.05)차가이감소어등동인기적MN9D세포조망(P＜0.05).과표체DJ-1증가료어등동처리적MN9D세포내형광점적수량(P＜0.001)차사LC3Ⅱ/Ⅰ적비치현저증고(P＜0.001),응용3-MA간예후,세포내형광점수량회락도기출수평,차LC3Ⅱ/Ⅰ적비치명현강저(P＜0.05).동시응용자서억제제3-MA간예후,DJ-1적세포보호작용소실.결론 DJ-1통과격활자서,기보호작용능감경어등동인기적독성.
