基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
7期
819-823
,共5页
杨莉%朱筑霞%刘晓红%胡晓霞%王红梅%王旭东
楊莉%硃築霞%劉曉紅%鬍曉霞%王紅梅%王旭東
양리%주축하%류효홍%호효하%왕홍매%왕욱동
17β-雌二醇%细胞转化%敏感性%卡配因%乳腺上皮细胞
17β-雌二醇%細胞轉化%敏感性%卡配因%乳腺上皮細胞
17β-자이순%세포전화%민감성%잡배인%유선상피세포
17β-estradiol%transformation%sensibility%calpain%mammary epithelial cell
目的 探讨经雌激素(E2)转化的MCF-10A乳腺上皮细胞对E2刺激的敏感性及细胞内钙蛋白酶(CANP)在E2效应中的介导作用,以深入了解E2的信号传导机制.方法 以E2转化的MCF-10A乳腺上皮细胞为研究模型、用E2(50 nmol/L)刺激细胞,以蛋白印迹法观察蛋白分子质量变化,以CANP特异性底物局部黏着激酶(FAK)蛋白剪切作为CANP激活的指标,伤口愈合实验观察细胞迁移变化,CANP抑制剂预处理观察CANP在E2效应中的作用.结果 转化细胞CANP活性明显高于非转化细胞,表现为前者出现FAK明显蛋白剪切,而后者FAK主要为野生型(125 ku),同时转化细胞迁移明显增强(P＜0.01).E2(10 nmol/L)刺激转化细胞可进一步促进FAK蛋白剪切和细胞迁移(P＜0.01),而非转化细胞对E2刺激不敏感.CANP抑制剂-1(ALLN)可有效阻断E2刺激转化细胞FAK蛋白剪切及细胞迁移(P＜0.01).结论 转化细胞对E2刺激的敏感性增加,其机制可能与胞内CANP活性增强有关,提示在转化细胞存在活跃的E2-CANP-FAK信号活动.
目的 探討經雌激素(E2)轉化的MCF-10A乳腺上皮細胞對E2刺激的敏感性及細胞內鈣蛋白酶(CANP)在E2效應中的介導作用,以深入瞭解E2的信號傳導機製.方法 以E2轉化的MCF-10A乳腺上皮細胞為研究模型、用E2(50 nmol/L)刺激細胞,以蛋白印跡法觀察蛋白分子質量變化,以CANP特異性底物跼部黏著激酶(FAK)蛋白剪切作為CANP激活的指標,傷口愈閤實驗觀察細胞遷移變化,CANP抑製劑預處理觀察CANP在E2效應中的作用.結果 轉化細胞CANP活性明顯高于非轉化細胞,錶現為前者齣現FAK明顯蛋白剪切,而後者FAK主要為野生型(125 ku),同時轉化細胞遷移明顯增彊(P＜0.01).E2(10 nmol/L)刺激轉化細胞可進一步促進FAK蛋白剪切和細胞遷移(P＜0.01),而非轉化細胞對E2刺激不敏感.CANP抑製劑-1(ALLN)可有效阻斷E2刺激轉化細胞FAK蛋白剪切及細胞遷移(P＜0.01).結論 轉化細胞對E2刺激的敏感性增加,其機製可能與胞內CANP活性增彊有關,提示在轉化細胞存在活躍的E2-CANP-FAK信號活動.
목적 탐토경자격소(E2)전화적MCF-10A유선상피세포대E2자격적민감성급세포내개단백매(CANP)재E2효응중적개도작용,이심입료해E2적신호전도궤제.방법 이E2전화적MCF-10A유선상피세포위연구모형、용E2(50 nmol/L)자격세포,이단백인적법관찰단백분자질량변화,이CANP특이성저물국부점착격매(FAK)단백전절작위CANP격활적지표,상구유합실험관찰세포천이변화,CANP억제제예처리관찰CANP재E2효응중적작용.결과 전화세포CANP활성명현고우비전화세포,표현위전자출현FAK명현단백전절,이후자FAK주요위야생형(125 ku),동시전화세포천이명현증강(P＜0.01).E2(10 nmol/L)자격전화세포가진일보촉진FAK단백전절화세포천이(P＜0.01),이비전화세포대E2자격불민감.CANP억제제-1(ALLN)가유효조단E2자격전화세포FAK단백전절급세포천이(P＜0.01).결론 전화세포대E2자격적민감성증가,기궤제가능여포내CANP활성증강유관,제시재전화세포존재활약적E2-CANP-FAK신호활동.
