基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
7期
787-792
,共6页
张艳敏%漆正宇%郭新%崔光辉%秦洁
張豔敏%漆正宇%郭新%崔光輝%秦潔
장염민%칠정우%곽신%최광휘%진길
小鼠诱导性多能干细胞%生殖细胞%EZH2%全反式视黄酸
小鼠誘導性多能榦細胞%生殖細胞%EZH2%全反式視黃痠
소서유도성다능간세포%생식세포%EZH2%전반식시황산
mouse induced pluripotent stem cells%primordial stem cell%EZH2%atRA
目的 探讨组蛋白甲基转移酶EZH2在小鼠iPS细胞系IP14D-1向生殖细胞分化过程中的作用.方法 将小鼠iPS细胞系IP14D-1通过悬浮培养分化形成拟胚体(iEBs)作为向生殖细胞分化的启动步骤,1μmol/L全反式维甲酸(atRA)持续诱导iEBs 2、4和7d,采用实时RT-PCR、荧光定量RT-PCR、免疫荧光检测atRA处理前后EZH2和生殖细胞分化标志性基因Stra8在iEBs中的表达.结果 在atRA诱导IP14D-1来源的iEBs中,EZH2表达在诱导后2d达到高峰,伴随atRA诱导,EZH2表达减弱；而生殖细胞分化标志性基因Stra8其变化特点与EZH2相反,无atRA诱导时EBs表达Stra8较弱,伴随atRA诱导,Stra8表达增强.EZH2和Stra8阳性信号分别定位于胞膜和胞质,其变化特点与PT-PCP结果相一致.结论 atRA诱导使EZH2低水平表达时期提前出现,伴随Stra8增强表达,启动了小鼠iPS细胞向生殖细胞的分化进程.
目的 探討組蛋白甲基轉移酶EZH2在小鼠iPS細胞繫IP14D-1嚮生殖細胞分化過程中的作用.方法 將小鼠iPS細胞繫IP14D-1通過懸浮培養分化形成擬胚體(iEBs)作為嚮生殖細胞分化的啟動步驟,1μmol/L全反式維甲痠(atRA)持續誘導iEBs 2、4和7d,採用實時RT-PCR、熒光定量RT-PCR、免疫熒光檢測atRA處理前後EZH2和生殖細胞分化標誌性基因Stra8在iEBs中的錶達.結果 在atRA誘導IP14D-1來源的iEBs中,EZH2錶達在誘導後2d達到高峰,伴隨atRA誘導,EZH2錶達減弱；而生殖細胞分化標誌性基因Stra8其變化特點與EZH2相反,無atRA誘導時EBs錶達Stra8較弱,伴隨atRA誘導,Stra8錶達增彊.EZH2和Stra8暘性信號分彆定位于胞膜和胞質,其變化特點與PT-PCP結果相一緻.結論 atRA誘導使EZH2低水平錶達時期提前齣現,伴隨Stra8增彊錶達,啟動瞭小鼠iPS細胞嚮生殖細胞的分化進程.
목적 탐토조단백갑기전이매EZH2재소서iPS세포계IP14D-1향생식세포분화과정중적작용.방법 장소서iPS세포계IP14D-1통과현부배양분화형성의배체(iEBs)작위향생식세포분화적계동보취,1μmol/L전반식유갑산(atRA)지속유도iEBs 2、4화7d,채용실시RT-PCR、형광정량RT-PCR、면역형광검측atRA처리전후EZH2화생식세포분화표지성기인Stra8재iEBs중적표체.결과 재atRA유도IP14D-1래원적iEBs중,EZH2표체재유도후2d체도고봉,반수atRA유도,EZH2표체감약；이생식세포분화표지성기인Stra8기변화특점여EZH2상반,무atRA유도시EBs표체Stra8교약,반수atRA유도,Stra8표체증강.EZH2화Stra8양성신호분별정위우포막화포질,기변화특점여PT-PCP결과상일치.결론 atRA유도사EZH2저수평표체시기제전출현,반수Stra8증강표체,계동료소서iPS세포향생식세포적분화진정.
