基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
8期
960-965
,共6页
王淳%李波%方文刚%陈誉华
王淳%李波%方文剛%陳譽華
왕순%리파%방문강%진예화
胎盘生长因子%血脑屏障%紧密连接%Rho/ROCK
胎盤生長因子%血腦屏障%緊密連接%Rho/ROCK
태반생장인자%혈뇌병장%긴밀련접%Rho/ROCK
placental growth factor%blood-brain barrier%tight junction%Rho/ROCK
目的 探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑微血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制.方法 利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响；用Western blot法及免疫荧光法检测HBMEC间紧密连接相关蛋白质occludin和ZO-1的表达及分布,用蛋白激酶抑制剂干预和Western blot法检测Rho蛋白活性.结果 25 ng/mL PLGF 30 min显著降低体外血脑屏障模型TEER,使其通透性增高(P＜0.05)；增加S-occludin表达的同时降低了IS-occludin的表达,使ZO-1蛋白在细胞周边分布减少；此外,ROCK蛋白激酶抑制剂Y27632抑制了PLGF引起的体外血脑屏障透过性增高(P＜0.05),并激活细胞内Rho激酶活性.结论 PLGF通过激活HBMEC内Rho/ROCK信号通路,影响HBMEC间紧密连接完整性,进而改变血脑屏障的通透性.
目的 探討胎盤生長因子(PLGF)影響人腦微血管內皮細胞(HBMEC)間通透性的分子機製.方法 利用HBMEC構建體外血腦屏障模型,測定跨內皮細胞電阻抗(TEER)及檢測HRP通過率,分析PLGF對血腦屏障完整性的影響；用Western blot法及免疫熒光法檢測HBMEC間緊密連接相關蛋白質occludin和ZO-1的錶達及分佈,用蛋白激酶抑製劑榦預和Western blot法檢測Rho蛋白活性.結果 25 ng/mL PLGF 30 min顯著降低體外血腦屏障模型TEER,使其通透性增高(P＜0.05)；增加S-occludin錶達的同時降低瞭IS-occludin的錶達,使ZO-1蛋白在細胞週邊分佈減少；此外,ROCK蛋白激酶抑製劑Y27632抑製瞭PLGF引起的體外血腦屏障透過性增高(P＜0.05),併激活細胞內Rho激酶活性.結論 PLGF通過激活HBMEC內Rho/ROCK信號通路,影響HBMEC間緊密連接完整性,進而改變血腦屏障的通透性.
목적 탐토태반생장인자(PLGF)영향인뇌미혈관내피세포(HBMEC)간통투성적분자궤제.방법 이용HBMEC구건체외혈뇌병장모형,측정과내피세포전조항(TEER)급검측HRP통과솔,분석PLGF대혈뇌병장완정성적영향；용Western blot법급면역형광법검측HBMEC간긴밀련접상관단백질occludin화ZO-1적표체급분포,용단백격매억제제간예화Western blot법검측Rho단백활성.결과 25 ng/mL PLGF 30 min현저강저체외혈뇌병장모형TEER,사기통투성증고(P＜0.05)；증가S-occludin표체적동시강저료IS-occludin적표체,사ZO-1단백재세포주변분포감소；차외,ROCK단백격매억제제Y27632억제료PLGF인기적체외혈뇌병장투과성증고(P＜0.05),병격활세포내Rho격매활성.결론 PLGF통과격활HBMEC내Rho/ROCK신호통로,영향HBMEC간긴밀련접완정성,진이개변혈뇌병장적통투성.
