基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2013年
8期
947-954
,共8页
王秦%成凤%匡文斌%董晋豫%马婷婷%熊海玉%涂植光
王秦%成鳳%劻文斌%董晉豫%馬婷婷%熊海玉%塗植光
왕진%성봉%광문빈%동진예%마정정%웅해옥%도식광
Ad-IL-12%人卵巢癌细胞SKOV3%增殖%凋亡
Ad-IL-12%人卵巢癌細胞SKOV3%增殖%凋亡
Ad-IL-12%인란소암세포SKOV3%증식%조망
Ad-IL-12%human ovary cancer cells SKOV3%proliferation%apoptosis
目的 探讨重组腺病毒Ad-IL-12感染人外周血淋巴细胞后对人卵巢癌细胞SKOV3周期、增殖和凋亡的影响.方法 采用重组人IL-12腺病毒(Ad-IL-12)感染人外周血淋巴细胞,感染48 h后与人卵巢癌细胞SKOV3共培养(SKOV3/Ad-IL-12),同时设未感染组(SKOV3)和Ad-GFP空载感染组(SKOV3/Ad-GFP)作为对照.RT-PCR检测IL-12双亚基P35和P40的mRNA表达,ELISA检测细胞培养上清中IL-12 P70蛋白的分泌,CCK8法检测卵巢癌细胞增殖,流式细胞术分析卵巢癌细胞周期和凋亡,RT-PCR和Western blot检测抗凋亡蛋白BCL-2、survivin 的表达.结果 重组腺病毒Ad-IL-12可成功感染人外周血淋巴细胞,分泌较高水平的IL-12 P70蛋白;淋巴细胞过表达IL-12可抑制SKOV3细胞的增殖;与未感染组和空载组相比,SKOV3/Ad-IL-12组G1期细胞显著增加,凋亡率显著升高(P<0.05),SKOV3细胞中抗凋亡蛋白BCL-2和survivin显著下调(P<0.05).结论 人IL-12基因重组腺病毒可以成功感染人外周血淋巴细胞,分泌IL-12 P70蛋白,并可以通过阻滞细胞周期进程和促进细胞凋亡抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖.
目的 探討重組腺病毒Ad-IL-12感染人外週血淋巴細胞後對人卵巢癌細胞SKOV3週期、增殖和凋亡的影響.方法 採用重組人IL-12腺病毒(Ad-IL-12)感染人外週血淋巴細胞,感染48 h後與人卵巢癌細胞SKOV3共培養(SKOV3/Ad-IL-12),同時設未感染組(SKOV3)和Ad-GFP空載感染組(SKOV3/Ad-GFP)作為對照.RT-PCR檢測IL-12雙亞基P35和P40的mRNA錶達,ELISA檢測細胞培養上清中IL-12 P70蛋白的分泌,CCK8法檢測卵巢癌細胞增殖,流式細胞術分析卵巢癌細胞週期和凋亡,RT-PCR和Western blot檢測抗凋亡蛋白BCL-2、survivin 的錶達.結果 重組腺病毒Ad-IL-12可成功感染人外週血淋巴細胞,分泌較高水平的IL-12 P70蛋白;淋巴細胞過錶達IL-12可抑製SKOV3細胞的增殖;與未感染組和空載組相比,SKOV3/Ad-IL-12組G1期細胞顯著增加,凋亡率顯著升高(P<0.05),SKOV3細胞中抗凋亡蛋白BCL-2和survivin顯著下調(P<0.05).結論 人IL-12基因重組腺病毒可以成功感染人外週血淋巴細胞,分泌IL-12 P70蛋白,併可以通過阻滯細胞週期進程和促進細胞凋亡抑製人卵巢癌細胞SKOV3的增殖.
목적 탐토중조선병독Ad-IL-12감염인외주혈림파세포후대인란소암세포SKOV3주기、증식화조망적영향.방법 채용중조인IL-12선병독(Ad-IL-12)감염인외주혈림파세포,감염48 h후여인란소암세포SKOV3공배양(SKOV3/Ad-IL-12),동시설미감염조(SKOV3)화Ad-GFP공재감염조(SKOV3/Ad-GFP)작위대조.RT-PCR검측IL-12쌍아기P35화P40적mRNA표체,ELISA검측세포배양상청중IL-12 P70단백적분비,CCK8법검측란소암세포증식,류식세포술분석란소암세포주기화조망,RT-PCR화Western blot검측항조망단백BCL-2、survivin 적표체.결과 중조선병독Ad-IL-12가성공감염인외주혈림파세포,분비교고수평적IL-12 P70단백;림파세포과표체IL-12가억제SKOV3세포적증식;여미감염조화공재조상비,SKOV3/Ad-IL-12조G1기세포현저증가,조망솔현저승고(P<0.05),SKOV3세포중항조망단백BCL-2화survivin현저하조(P<0.05).결론 인IL-12기인중조선병독가이성공감염인외주혈림파세포,분비IL-12 P70단백,병가이통과조체세포주기진정화촉진세포조망억제인란소암세포SKOV3적증식.